ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Спектр патогенности в естественных условиях. Болеют как дикие, так и домашние кролики, принадлежащие к родам Sylvilagus и Oryctolagus. Дикие зайцы (род Lepus) болеют редко. Вирулентность полевых штаммов вируса миксомы в Австралии за период 1959- 1974 г. изменилась. Вначале (с 1959 по 1964 г.) исчезли высоковирулентные и аттенуированные штаммы, что, видимо, обусловлено повышением резистентности кроликов. За период 1962-1981 г. в распределении штаммов по степени вирулентности произошли значительные изменения: увеличилось количество полевых изолятов, вызывающих падеж 95-99% кроликов. Всегда с развитием инфекции миксоматоза в полевых'.условиях происходило 2 параллельных явления: возбудитель снижал свою вирулентность, а восприимчивые животные становились более устойчивыми. ,

ДИАГНОСТИКА

Диагноз ставят на основании эпизоотологичёских данных, характерной клинической картины, патологоанатомических изменений и лабораторного исследования. Лабораторная диагностика заключается в постановке биологической пробы на^ кроликах и гистологическом анализе патологического материала.

Выделение вируса. Вирус вначале размножается на месте введения, затем через 48 ч обнаруживается в регионарных лимфоузлах. В крови, селезенке и легких выявляется через 72 ч, в коже и семенниках - на 4-й дн, в конъюнктиве, внешних половых органах и анусе - через 5 дн. Содержание вируса во всех органах и тканях ежедневно нарастает, за исключением крови, где накануне и в день смерти животного его количество снижается.

Подготовка материала. Для исследования в лабораторию доставляют клинически больных кроликов или трупы (не позднее чем через 2 ч после гибели). У вынужденно убитых или павших животных отбирают измененные участки кожи. Патологический материал доставляют в термосе со льдом или 50%-ном р-ре химически чистого глицерина.

Заражение кроликов. Используют молодых, в основном белых, кроликов массой 1,5 кг. На предварительно выбритый участок кожи в области бока 2-м кроликам внутрикожно вводят исследуемый материал по 0,1-0,2 мл и по одной капле в конъюнктивальные мешки глаз. Для контроля оставляют 2-х незараженных кроликов. Если проба положительная, то обьино на 3-6-й дн на месте инъекции появляются покраснение и отек, а на 5-10-й дн - конъюнктивит и ринит. При отечной форме на голове, ушах, анусе и наружных половых органах развивается отечно-сосудистая инфильтрация подкожной клетчатки, из глаз выделяется серозно-фибринозный или гнойный экссудат и на 7-16 день кролики погибают.

При узелковой форме на ушах, голове, веках и других частях тела образуются узелки, которые некротизируются. В этом случае животные иногда выживают. Диагноз на миксоматоз кроликов считается установленным при получении положительных результатов биологической пробы на кроликах и гистологического исследования. Срок исследования 15 дн. Заражение КЭ проводят на ХАО по общепринятой методике. При наличии вируса на ХАО наблюдают образование характерных фокусов (оспин).

Индикация и идентификация вируса. Вирусоскопия не применяется.

При ЭМ в цитоплазме клеток видны скопления зрелых вирионов - включения типа А, которые часто локализуются вблизи липидных включений. Часто вокруг скоплений сформировавшегося вируса видна многослойная мембрана, и вирионы вместе с участком клетки изолируются в цитосоме, где в дальнейшем подвергаются морфологической деструкции. Иногда обнаруживают фагоцитированные ядром полуразрушенные вегетативные формы вирионов. На ранних стадиях цитопатологии происходит полная деструкция клетки и вирионы освобождаются в межклеточное пространство.

Гистологически при миксоматозе в клетках эпидермы кожи и корневого влагалища волос наблюдаются вакуолизация цитоплазмы, кариолизис и кареорексис, встречаются цитоплазматические ацидофильные включения: в коже и подкожной клетчатке отмечают серозный инфильтрат, набухшие фибробласты, ретикулярные клетки, эозинофилы и миксомные клетки, образующие рыхлую сетку, заполненную слизистой жидкостью.

ИФА. Для серологической диагностики ELISA имеет преимущество - высокая чувствительность, простота реакции, высокая производительность, стандартизация учета.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Не проводятся.

Дифференциальная диагностика. Миксоматоз у кроликов рода Syvilagus может протекать так же, как инфекционный фиброматоз: без признаков нарушения общего состояния, поражений слизистых оболочек и блефароконъюнктивита; при этом обнаруживаются лишь небольшие подкожные новообразования в различных участках тела, регрессирующие через несколько недель. Тем не менёе у новорожденных крольчат болезнь протекает остро и с высокой летальностью. Миксоматоз необходимо также дифференцировать от стафилоккоза и бродячей пиемии с подкожными абсцессами. Последние в отличие от миксоматозных абсцессов содержат густой белый гнойный экссудат. Кроме того, при бродячей пиемии отсутствуют поражения головы, глаз и аногенитальной области. Массового распространения за короткий срок эта болезнь не приобретает, она длится дольше, но нет большого отхода.

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

У выживших кроликов развивается активный иммунитет. Молодняк, родившийся от ма- терей-реконвалесцентов, до 5-нёд возраста устойчив к инфекции благодаря пассивно переданным материнским АТ.

Опыты по применению инактивированной вакцины не привели к успеху. Ветеринарная практика ряда стран, в т.ч. РФ, имеет 2 типа вакцин: из вируса фибромы Шоупа (гетеровирулентный вирус) и из ослабленного вируса миксоматоза (1,2, 7, 8,9).

Первый успех был достигнут благодаря гетероиммунитету, используя безвредный для кроликов вирус фибромы Шоупа: 2-кратная прививка этим вирусом защищала 40-90% кроликов от миксоматоза в течение 2-4 мес. С целью повышения иммуногенности в дальнейшем были получены живые вакцины из аттенуированных штаммов вируса миксоматоза. С этой целью вирус пассировали в первичной культуре клеток почки кроликов при 37, 34 и 33°С соответственно в течение 5, 20 и 79 пассажей. Вирус дважды клонировали методом бляшек на 36 и 65 пассажах. Вторым этапом было пассирование в культуре клеток КЭ при 33°С в течение 25 пассажей в сочетании с перемежающимися пассажами и клонированием в культуре клеток почки кролика на уровне 6, 10 и 24 пассажей. После пассажей в культуре клеток КЭ был получен аттенуированный штамм вируса миксомы. Он утратил патогенность для кроликов разных возрастов, не передавался горизонтально любыми способами, в том числе с помощью комаров, обладал выраженными антигенной и иммуногенной активностями при внутрикожном, интраназальном и аэрозольном применениях. После внутрикожного введения вакцины иммунитет продолжался 6-12 мес. Аэрозольным методом можно иммунизировать домашних и диких кроликов (7, 8).

Другие авторы аттенуировали шт. СК-82 вируса миксомы путем 5 пассажей в КЭ и 20 в первичной культуре клеток почки крольчонка. Такой вирус при подкожном и внутримышечном введении вызывал у кроликов незначительное повышение температуры и образование ВНА в титре 1:20 - 1:320. Кролики с титром ВНА 1:80 оказались полностью устойчивыми к экспериментальному заражению вирулентным штаммом вируса миксомы (6,7).

Живую гетерологическую вакцину готовят из вируса фибромы, размноженного в культуре клеток и повторного замораживания - оттаивания и обработки ультразвуком. Лиофили- зированная вакцина из вируса фибромы вызывает иммунитет на 3-й дн. Иммунитет закрепляют ослабленным вирусом миксомы. Применяемая в Бельгии гомологичная вакцина (ММ- 16005) также оказалась безвредной, не вызывала отрицательных реакций даже в крольчатниках, неблагополучных по пастереллезу. Внутрикожные инъекции её в область уха вызывали развитие местных узелков, полностью исчезающих через 6 нед. Гетерологичный штамм вируса фибромы Шоупа защищал кроликов не более 3 мес.

Серологическая оценка поствакцинального иммунитета. В связи с тем, что серологические показатели в оценке постинфекционного и поствакцинального иммунитетов не изучены, оценка их по этим тестам не проводится.

Помимо вакцины показана противовирусная активность индукторов иммуногенеза (РНК и полигуанидина) в отношении вирусов миксомы и фибромы Шоупа при внутрикожном введении вирусов. Лучший противовирусный эффект был получен при введении индуктора РНК за 4 ч до заражения (6).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1.Бояринцев Л.Е. Тр. НИИПЗК им. В. А. Афанасьева, 1989, 165. 2.Симонова Э.Г. и др. Матер. н. конф. ВНИИВВИМ, 1992, Покров, 168. З.Сюрин В.Н. и др. Диагн. вир. бол. животных, М., Агропромиздат, 1991. 4.Сюрин В.Н. и др. Частн. вет. вирусол. М., Колос, 1979. 5.

Фомина Н.В. и др. Вирусы животных., М., MBA, 1991. 6.Jackson R.J. et. al. J Gen Virol, 1992, 73, 12 :3241. 7.Knezevic N. Veter Clasnic, 1986, 40 :901. 8.Peeters J.E. et. al. Rev Agr, 1987,

40, 5 .1255. 9.Saurat P. et.al. Rev Med Vet, 1978, 129 .415.