ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Морфология и химический состав. Полипептидный состав изолятов, выделенных в Англии, Австралии и Италии в 1972 - 1973 гг., различен. Вирус содержит три белка: УР1, УР2 и УРЗ с мол.м. 33, 29 и 32 кД соответственно. Белки УР1 и УР2 ответственны за индукцию ВНА (12). РНК вируса можно обнаружить с помощью ПЦР в зараженных первичных клетках почки свиней. Очищенные препараты вирусной РНК подвергают обратной транскрипции. Амплификацию полученной кДНК проводят праймерами, амплифицирую- щими фрагменты капсидного белка и неструктурного белка ЬА, а также некодирующий фрагмент генома. РНК, выделенная из незараженных клеток дает отрицательные результаты в ПЦР (10). РНК генома вируса типа 11 (ЭВ-11) имеет длину 7438 н и кодирует полипротеины из 2195 остатков. По организации 5’-конца некодирующей области ЭВ-11 похож на другие энтеровирусы, но имеет уникальный участок поли(У) длиной 12 н (5). Установлено, что нуклеотидная последовательность патогенного шт. 27/72 сложена из последовательностей 148 отдельных клонов. Геном этого шт. представляет 7400 нуклеотидов. Установлено 98 различий из 7400 нуклеотидов, 14 нуклеотидных различий между патогенным и непатогенным штаммами вируса ВЕС (11).

Устойчивость. Во внешней среде вирус высокоустойчив: в инфицированном навозе и мусоре сохраняет свою активность 8 недель, в искусственно инфицированном жидком навозе при 5°С - в течение 38 дн. Устойчив к эфиру и pH в широком диапазоне (от 2,0 до 12,5).

В навозе, находящемся в пластиковых мешках при 12-17°С, вирус оставался жизнеспособным в течение 138 дн. хранения, в образцах материала инфицированных туш, хранившихся при минус 20°С, выживал в течение 11 месяцев. Молочная кислота, образующаяся в мышцах павшего животного в результате трупного окоченения, на жизнеспособность вируса не влияет. Поэтому мясо больных животных может быть причиной вспышки болезни.

Вирус термолабилен, разрушается при 60°С в течение 30 мин. Гонконгский и итальянский штаммы более резистентны к термоинактивации, чем вирус ящура; оба стабилизируются 1М MgCl2, тогда как последний способствует инактивации вируса ящура. Из дезинфицирующих средств эффективны гипохлорид натрия (0,5 %) и йодозол (0,2%), ЫаОН и формалин не эффективны.

Антигенная структура. При ультрацентрифугировании в градиенте сахарозы выделено два типа комплементсвязывающих частиц с константой седиментации 150 Б и 80 Б. Плотность тяжёлых частиц 1,34 г/см3, лёгких - 1,30 г/см3. Диаметр более лёгких частиц 30-32 нм.

Антигенная активность. У поросят появляются ВНА, которые выявляются в течение четырёх месяцев после переболевания. Ранние ВНА обнаруживаются на 4-й день. Антисыворотки к вирусу получают на морских свинках.

Антигенная вариабельность и родство. Вирус имеет подтиповые варианты, подобные таковым у вируса ящура (величина достигает 0,2-0,3). В РДП с сывороткой свиней- реконвалесцентов найдены антигенные различия между шт. Италия/72, Англия/72, Австра лия/73 и Польша/73. Антигенная структура штаммов, выделенных в Италии в 1972-1973 гг., отличалась от таковой штамма, выделенного в 1966 г. Антисыворотка, приготовленная на штаммы, выделенные в 1972-1973 гг., давала четкую РСК со штаммом, полученным в 1966 г., но не наоборот. PH дала аналогичные результаты. Известны штаммы вируса: Англия/72 (эталон ИКД 27/72), Италия 1/66 и 3/73, Австрия 1/73, Франция 1/73, Польша 1/73.

Между вирусом ВБС и вирусом Коксаки типа В 5 (КВ5) существует тесное серологическое родство. Вирус ВБС легко нейтрализуется антисывороткой к вирусу Коксаки В5, а сыворотка свиней-реконвалесцентов нейтрализует шт. Коксаки В5, выделенные от человека. Однако, в прямых опытах перекрестного иммунитета иммунологического родства между этими вирусами не установлено.

Известно, что вирус Коксаки А16 вызывает ящуроподобное изменение у детей. Возможно, энгеровирус свиней Англия/72 (возбудитель ВБС) является вариантом штамма вируса, который не вызывает таких поражений у человека.

Гемагглютинирующие свойства не установлены.

Локализация вируса, вирусоносительство и вирусовыделение. Из органов и тканей свиней-реконвалесцентов вирус везикулярной болезни выделить не удается. Однако он долго сохраняется на поверхности тела животных и в навозе. Даже в латентном периоде он накапливается в коже, мышцах, лимфоузлах (титр до 4 lg/r ткани) и сохраняется в течение двух недель после убоя животного. В наивысшей концентрации вирус находят в секретах животных в первую неделю болезни. В течение 14-16 дн. после заражения его можно выделить из экскрементов. В высокой концентрации он содержится в эпителии пораженных участков кожи, выявлен в лимфоузлах и костном мозге туш через 13 дн. после убоя больных животных. По другим данным, вирус постоянно в течение 45 сут. выявляется в фекалиях и нерегулярно обнаруживается до 110 сут. Из мочи, выделений носовой полости и глоточной жидкости его можно изолировать нерегулярно в течение 90, 80 и 65 сут. соответственно. Таким образом, пораженные животные могут контаминировать внешнюю среду и заражать интактных свиней в течение более трех месяцев.

Экспериментальная инфекция. Заболевание легко воспроизводится при оральном, подкожном, внутрикожном и контактном способах заражения. Однако не все штаммы вируса, выделенные в разных странах, обладают одинаковой способностью вызывать везикулы на месте введения (внутрикожно в мякиш). У свиньи, зараженной в пятачок, везикулярные поражения на месте введения вируса развиваются уже через 36 ч. Болезнь прогрессирует, охватывая кожу, суставы конечностей, морду и язык. Однако заживление дефектов кожи происходит быстрее, чем при ящуре. При интрацеребральном заражении 10-дн. поросят шт, UKG 27/72 симптомы болезни развивались на 7-8-й день и отмечались до 16 дня. Вирус выделяли из коры головного мозга на 2-4-й день после заражения, АТ появлялись на 8-й день.

У подсаженных овец явных признаков болезни не обнаружено, однако через 4-7 дн. в глотке обнаружили большое количество вируса, что указывало на размножение его в организме овец, у шести из восьми овец были выявлены ВНА в значительном титре, у четырех животных они удерживались 6 недель. Кроме поросят, экспериментально можно заразить однодневных мышат, которые заболевают через 24-30 ч с признаками поражения ЦНС (тремор, нарушение координации движений, к 7-у дню - параличи и смерть). Вирус активно размножается в головном мозге и поражает мозговую ткань (деструкция нейронов в ганглиозном слое аммонова рога, дегенерация и распад нервных клеток). Вирус удалось реизоли- ровать из мозга инфицированных мышей. Максимален титр его на четвертые сутки. После заражения вирусом ящура у мышат также развиваются параличи, однако мозговая ткань не поражается. Метод биопробы на мышах рекомендуется для дифференциальной диагностики ВБС от ящура.

Культивирование. Вирус ВБС размножается без адаптации в первичной культуре клеток почки свиньи и перевиваемых линиях свиного происхождения РК-15 и IB-RS-2. Он вызывает ЦПИ и бляшки. Первые изменения в инфицированной вирусом культуре клеток почки свиньи появляются через 3 ч после заражения и характеризуются вакуольной дистрофией цитоплазмы и интенсивной базофилией ядра. Через 8 ч в цитоплазме наблюдаются пикно- зированные диски или кариорексис. Полная дегенерация клеточного слоя обычно наступает через 24-36 ч после заражения. Наряду с ЦПИ изменяется энзиматическая активность клеток: увеличивается содержание сукциндегидрогеназы и уменьшается количество лактатде- гидрогеназы. У адаптированного к перевиваемым клеткам IB-RS-2 вируса цикл размножения равен 4 ч, а титр его достигал 2x109 БОЕ/мл. Шт. Н/3’76 успешно культивировали в клетках IBRS-2. С помощью монАТ было выявлено 5 сайтов нейтрализации (7)