МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛКАЛОИДОВ  

Принцип. Метод основан на экстракции алкалоидов из щелочной среды хлороформом и идентификации их посредством специфических реакций с различными реагентами — Эрдмана, Ман- делина, Вагнера, Драгендорфа, растворами танина, пикриновой, серной и азотной кислот (Сметов с соавт., 1987).

Реактивы: алкалоиды аконитин, атропин, берберин, бруцин, колхицин, кураре, дигитамин, дигитоксин, морфин, никотин, фи- зостиомин, пикротоксин, соланин, стрихнин, вератрин и др.; аммония ванадат мета (ч. д. а.); висмута нитрат (ч. д. а.); йод элементный (ч. д. а.); калия гидроксид (ос. ч.); калия йодид (х. ч.); кислота азотная (х. ч.); кислота серная (ос. ч.); кислота хлористоводородная (х. ч.); кислота пикриновая (ч. д. а.);

3%-ный раствор натрия гидроксида (х. ч.); реактив I: концентрированная серная кислота; реактив II: концентрированная азотная кислота; реактив III (Эрдмана). К 20 мл концентрированной серной кислоты прибавляют азотную кислоту (10 капель кислоты на 100 мл дистиллированной воды);

реактив IV (Манделина).

реактив V (Вагнера). 5 г йода в 100 мл 10%-ного раствора калия йодида;

реактив VI: 5%-ный водный раствор танина; реактив VII: 1%-ный водный раствор пикриновой кислоты; реактив VIII (Драгендорфа). 8 г висмута нитрата растворяют в 20 мл азотной кислоты, полученный раствор вливают в концентрированный раствор калия йодида (27,2 г соли в 20 мл воды), через сутки фильтруют, объем фильтрата доводят до 100 мл дистиллированной водой;

реактив тимолфталеиновый. В 5 мл дистиллированной воды растворяют 1,5 г калия гидроксида или 1,0 г натрия гидроксида. 0,3 мл приготовленного раствора щелочи смешивают с 14,7 мл свежепро- кипяченной дистиллированной воды, берут 0,1 г свежеперекрис- таллизованного из спирта тимолфталеина и растворяют в 15 мл этанола-ректификата. К полученному раствору тимолфталеина добавляют 5 мл раствора калия или натрия гидроксида. Реактив окрашен в интенсивно-синий цвет. В склянке с притертой пробкой хранят 3 мес; танин (ч. д. а.);

тимолфталеин (тимолсульфофталеин), индикатор. Оборудование: весы аналитические и технические; баня водяная; колбы конические различной вместимости и другая посуда и оборудование.

Ход определения. Готовят экстракт для определения алкалоидов (по Габовичу). Пробу массой 1 г тщательно измельчают и переносят в коническую колбу с притертой пробкой на 50 мл, приливают 3 мл 3%-ного раствора натрия гидроксида (для сена — 5 мл, для муки и комбикорма — 15 мл), энергично встряхивают 1 мин. Приливают 10 мл хлороформа (для сена — 15 мл, для отрубей и муки — 25 мл), закрывают пробкой и еще раз встряхивают 3 мин. После отстаивания хлороформ фильтруют через бумажный фильтр в колбу или фарфоровую чашку, содержащую 5 мл воды, подкисленную двумя каплями кислоты хлористоводородной. Хлороформ отгоняют на водяной бане, водный остаток фильтруют и исследуют на алкалоиды.

Для идентификации алкалоидов в несколько пробирок небольшой вместимости (по числу реактивов и проб) вносят по 1 мл испытуемого подкисленного кислотой хлористоводородной раствора или же наносят по 1—2 капли раствора на часовые стекла. Затем добавляют равные объемы реактивов на алкалоиды и наблюдают за изменением окраски или образованием осадка на темном фоне. В присутствии алкалоидов в испытуемой жидкости появляются помутнение, взвесь. Может образоваться осадок, цвет которого зависит от использованных реактивов. Ставят не менее 3—4 групповых реакций с разными реактивами.

При подкислении раствора, содержащего алкалоиды, серной кислотой и обработке реактивом VIII (Драгендорфа) образуются следующие осадки: акониты (хромово-желтый), атропин (красно-жел- тый), колхицин, морфин (желто-красный), наркотин, никотин, бруцин, физостигмин, стрихнин (светло-желтый, постепенно темнеет), вератрин (светло-желтый, постепенно темнеет и переходит в канареечно-желтый).