Определение ФОП методами ГЖХ.  

Подготовка проб к анализу.

Принцип. Метод основан на разделении смеси пестицидов или других химических веществ на стеклянных колонках, заполненных жидкой фазой на твердом носителе, через которую пропускают инертный газ, чаще всего азот особой чистоты. Разделенные на колонке химические вещества с током газа-носителя поступают в детектор, реагирующий на определенную группу химических соединений. Для анализа ФОП чаще всего используют вариант пламенно-ионизационного детектора (ТИД) с насаженной на горелку таблеткой с цезия бромидом, реагирующим на ФОП. Сигнал с детектора поступает через усилительную систему на самописец или компьютер, который регистрирует сигнал в виде остроконечных пиков, площадь которых пропорциональна количеству вещества, содержащегося в пробе.

В качестве жидкой фазы при анализе антио, валексона, дурсбана, карбофоса, метафоса, метилнитрофоса, фосфамида и фозалона используют 3- или 5%-ный силанизированный метилсилоксан на хроматоне (8Е-30). Применяют также жидкую фазу ХЕ-60 (5%-ную). Колонки стеклянные, 1000 х 3 мм. При анализе неполярных и плохо испаряющихся пестицидов (например, фозалона) газ-носитель — азот особой чистоты со скоростью до 30 мл/мин.

Для определения хлорофоса и ДДВФ предложен газоадсорбционный метод, отличающийся от метода ГЖХ тем, что разделение пестицидов проводят не на жидкой, а на твердой фазе, в качестве которой используют полисорб-1 (В. В. Лещев, 1975).

При анализе этим методом пробу патологического материала (печень, почки) массой 10 г тщательно измельчают, помещают в склянку с притертой пробкой, заливают 60 мл ацетона, тщательно перемешивают и ставят в холодильник при температуре 4 °С на 1 ч. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в фарфоровую чашку и упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 15 мл смеси ацетон-вода 1:1. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты объединяют в делительной воронке на 250 мл и экстрагируют 30 мл хлороформа, тщательно взбалтывая воронку в течение 5—7 мин. Нижний (хлороформный) слой сливают в фарфоровую чашку, добавляют в нее 0,5—1,0 мл этанола и упаривают в токе воздуха до

Условия хроматографирования: температура колонки и испарителя 165 °С; скорость тока газа-носителя 22 мл/мин, водорода 14, воздуха 400 мл/мин; время удерживания хлорофоса 1,7 мин, ДДВФ 2,2 мин. Минимально детектируемое количество хлорофоса 0,1 нг, ДДВФ — 0,05 нг. Линейность детектирования сохраняется в пределах от 0,15 до 1,5 нг.

Клиническое значение. Обнаружение в патологическом материале (печень, почки, содержимое желудочно-кишечного тракта) любых количеств ФОП дает основание подозревать, что гибель животных произошла в результате их отравления этими веществами. Однако окончательный диагноз на отравление ФОП может быть поставлен, если данные лабораторного исследования подтверждаются анамнестическими сведениями, клиническими признаками интоксикации (нервно-токсический синдром, миоз зрачка глаз) и результатами патологоанатомического исследования павших животных.