ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВА TOGAVIRIDAE

Семейство Togaviridae (от лат. toga - плащ) объединяет большую группу вирусов, поражающих многие виды позвоночных и членистоногих. Вирионы тогавирусов представляют собой сферические частицы диаметром 60-70 нм.

Геном представлен единой 1-спиральной линейной молекулой РНК позитивной полярности с мол.м. 4 МД. РНК составляет 8-9% массы вириона; 5-конец кэпирован 7- метшпуанозином, а 3'-конец полиаденилирован. Гены для неструктурных белков находятся на 5'-концевой части РНК. РНК тогавирусов инфекционна. В вирионах тогавирусов обнаружено 3-4 полипептида. Липопротеидная оболочка содержит липиды клеток хозяина и вирус- специфические полипептиды. Между вирусами одного рода имеется АГ-родство, но его нет между представителями различных родов. Размножение вирусов происходит в цитоплазме, а созревание включает процесс почкования через цитоплазматическую мембрану.

Семейство Togaviridae состоит из двух родов: Alphavirus и Rubivirus. 1.

Род Alphavirus (от греч. буквы “а” - alpha). Включает арбовирусы группы А (27 членов): Синдбис (прототипный вирус), западного, восточного и венесуэльского энцефалитов лошадей, леса Семлики, Гета, Чикунгунья и др. (Рис. 17). Диаметр вирионов составляет 70 нм, мол.м. 46 мД, плавучая плотность в сахарозе 1,2 г/см3, коэффициент седиментации 280S. Геном состоит примерно из 12000 нуклеотидов (4 МД) и составляет 8,7% массы вириона. Около 70% генома с 5'-конца кодирует 4 неструктурных белка, участвующих в репликации вирионной РНК. Гены структурных белков расположены на 3’-концевой части генома. В состав нуклеокапсидов входит один белок (С) с мол.м.ЗО кД. Наружная оболочка вирионов состоит из 2 гликопротеинов (El, Е2) с мол.м.

Род Rubivirus (от лат. rubeus - красноватый). Включает всего одного представителя -

вирус краснухи. Вирионы - 60 нм. Геном вируса состоит из 9757 нуклеотидов (3,4 мД), 5 - конец кэпирован, 3'-конец полиаденилирован. В состав нуклеокапсида входит 1 белок с мол.м. 33-34 кД (С), в состав наружной оболочки - 2 гликопротеина с мол.м. 58-59 (El) и 42-48 кД (Е2). Все 3 структурных белка образуются из полипротеина после трансляции 24S субгеномной РНК. Естественный хозяин - человек. Вирус передается аэрозольным и конге- нитальным путями.

ЗАПАДНЫЙ АМЕРИКАНСКИЙ ЭНЦЕФАЛОМИЕЛИТ ЛОШАДЕЙ

West Equine encephalomielitis (WEE) (англ); Seuchenhafte Hinruckenmarkentzuundung der Pferde, Amerikanische Hinruckenmarkentzundung (нем)

Болезнь однокопытных и людей характеризуется острым коматозным состоянием, протекает с явлениями энцефалита, а иногда бессимптомно.

Болезнь встречается в западных и центральных районах США, Аргентине, Мексике, Канаде, Бразилии.

Клинические признаки и гагаюташнвлдаюжие тменвшя. Вгсга,~Е появляется лихорадка, затем л> раяазтся ЦНС (сонливость, гараличи). Смерпссть лкда нз превьшагг 2030% Пагагашгагамичгские именз- ния характеризуются д^)фузным эшэфалипм с шпичжм раооеянтао нэсрова шйрсноа, скхвемэм гигантских югаск наралгии (асгрсвдпв) и умершной НЕТОЧНОЙ инфилираигей мягких мозговых обстес или инфипыра- цдапериваадлярнашани Пораявния в датах сранах выра>гены слабо (2).

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Впервые вирус западного американского энцефаломиелита лошадей (ЗАЭЛ) выделили в Калифорнии в 1931 г. Мейер и др. из мозга больной лошади. В дальнейшем его выделяли от людей, лошадей, мулов, у которых он в естественных условиях вызывает инфекцию, и, кроме того, от белок, оленей, свиней, птиц многих видов, комаров и птичьих клещей.

Устойчивость. Благодаря большому содержанию липидов вирус разрушается под действием эфира и хлороформа, чувствителен к дезоксихолату. Протеазы (трипсин, химотрип- син и папаин) не оказывают на него влияния (в отличие от арбовирусов группы В). Инактивируется липазой, видимо, вследствие расщепления ферментом липидной оболочки. Установлена фотодинамическая инактивация метиленовым синим. Вирус чувствителен к действию рассеянного света и УФ лучам, которые разрушают его в течение нескольких минут. Формалин (в концентрации 1:500 - 1:2000), проникая через протеиновую оболочку, действует на нуклеиновую кислоту. Обработкой вируса формалином (в концентрации 10:2,5) и действием на него УФ лучами в эксперименте удавалось получать различные по биологическим свойствам клоны вируса (по патогенности для мышей, активности размножения в культуре клеток и терморезистентности в условиях 50°С). (J-пропиолактон в концентрации 0,1-0,2% инактивирует вирусы ЗАЭЛ и ВАЭЛ за несколько часов, поэтому широко используется для получения неинфекционных диагностикумов для РСК, гемагглютинации и АГ для гипериммунизации животных при получении иммунных сывороток. В отличие от вирусов группы В вирусы ЗАЭЛ и ВАЭЛ устойчивы к сульфгидрильным соединениям. Изоэлектрическая точка вируса при pH 6,5, наивысшая устойчивость при pH 6,5-8,5, вне этих пределов pH инфек- ционность вируса быстро падает. Он разрушается при 60°С в течение 10-20 мин. В условиях 4°С вирус в течение нескольких месяцев сохраняется в 50%-ном р-ре глицерина и в суспензиях, содержащих 2% бычьего альбумина или 20% сыворотки крови кроликов. В высушенном виде при -70° С вирус сохраняет жизнеспособность несколько лет. Р-ры хлорной извести (5%), фенола (5%) и креолина (2%) инактивируют его за 10 мин, фенол (1%) и хлороформ разрушают вирус в суспензии мозга за 10 дн.

Антигенная структура не изучена.

Антигенная активность. При инфицировании лошадей и лабораторных животных в сыворотке крови обнаруживают КСА, ВНА и анти-ГА. У инфицированных людей ВНА появляются быстро и сохраняются долго.

Антигенная вариабельность и родство. В АГ отношении вирус ЗАЭЛ стоит значительно ближе к вирусу Синдбис, чем другие представители альфавирусов. У данного вируса обнаружены АГ варианты.

Гемагглютинируннцие свойства. ГА свойства выявлены в отношении эритроцитов гусей и суточных цыплят. Обнаружен как связанный, так и отделяемый от вирусной частицы ГА. Его выявляют в вируссодержащей суспензии мозга мышей после обработки эфиром и ацетоном или при экстракции боратным буфером (pH 9,0), а также в жидкой фазе инфицированных тканевых культур. Оптимум pH 5,8-6,2, при котором четко проявляется РГА. Свежевыделенные штаммы обладают ГА-свойствами, тогда как штаммы, адаптированные в лабораторных условиях, могут их утратить. Вирус ЗАЭЛ обладает гемолитической активностью, способен интерферировать в организме мышей и инфицированных КЭ с различными арбо-, миксо- и другими вирусами.

Экспериментальная инфекция. При интрацеребральном заражении вирус вызывает менингоэнцефаломиелит у многих лабораторных животных и диких грызунов, обезьян, кроликов, молодых собак, оленей, поросят, телят, коз и некоторых птиц. Хомяков любого возраста, а также молодых мышей и морских свинок можно заразить внутримышечно, интра- перитонеально и подкожно. Вирус размножается в организме различных членистоногих.

Культивирование. Кроме лабораторных животных (особенно мышат-сосунов), вирус культивируется в КЭ при любом способе заражения. Эмбрионы погибают через 18-24 ч. Вирус размножается в различных культурах клеток: ФЭК, почек уток, обезьян, ягнят, телят, котят, кроликов, мышей, особенно в почечных клетках хомяка и некоторых перевиваемых линиях. ЦПИ появляются через 24-36 ч. В монослойной культуре клеток эмбрионов животных указанных видов вирус образует, бляшки, в перевиваемой линии L-клеток вызывает хроническую инфекцию.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции. Летом вирус может передаваться лошадям и человеку при укусе комаров.

Спектр патогенности в естественных условиях. По-видимому вирусы ЗАЭЛ, так же как и ВАЭЛ, патогенны, в основном, для птиц, лошадей, мулов и людей, которые поражаются случайно. У птиц многих видов вирус вызывает бессимптомную инфекцию. В 1963 г. ВНА в США обнаружены в сыворотке крови зайцев-беляков, у земляных белок, леопардовых лягушек и сусликов. В 1965 г. в Канаде во время эпизоотии ЗАЭЛ высокое вирусоноси- тельство было обнаружено у сусликов. Ранняя сезонная инфекция сусликов обусловлена комарами Culex tarsalis. По-видимому, суслики могут играть важную роль в диссиминации вируса. Имеется сообщение о выделении возбуди теля ЗАЭЛ из организма опоссума, личинок комаров Aedes caspiens и клопов Rhodnius prolixus и Triatoma infeshons. При экспериментальном заражении их вирус сохранялся в их организме в высоком титре до 28 дн.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз ставят на основании выделения вируса в период острого переболевания и серологических реакций. Его выделяют из крови больных, а в случае аутопсии - из ЦНС и внутренних органов. В природе исследуют диких животных и членистоногих. Для выделения вируса используют мышат 1-3-дн возраста, КЭ и куль туры клеток. Выделенный вирус идентифицируют в РЗГА и РСК; серодиагностику проводят в РСК, РЗГА и PH. Поскольку анти-ГА и ВНА сохраняются годами, а титр КСА после 6 мес значительно снижается, то обнаружение последних свидетельствует о недавно перенесенной инфекции. Для быстрой идентификации этого вируса предложен метод ИФ. В мазках-отпечатках из мозга интраце- ребрально зараженных мышат после появления симптомов болезни обнаруживают специфический АГ. В Канаде с диагностической целью применяют неинфекционный диагности- кум из вируса ЗАЭЛ, размноженного в культуре ФКЭ и инактивированного УФ лучами.

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

В неблагополучных районах применяют инактивированные вакцины. Непатогенный для мышей вариант вируса ЗАЭЛ был получен из изолята от диких птиц в культуре клеток почки хомячка и в дальнейшем селектирован методом бляшек (1).

ИНФЕКЦИЯ, ВЫЗЫВАЕМАЯ АЛЬФАВИРУСОМ ГЕТА

Вирус Гета является представителем рода Alphavirus семейства Togaviridae, вызывает вспышки острых заболеваний с высокой температурой и поражениями конечностей у японских беговых лошадей. В последствии его выделяли от свиней и новорожденных поросят погибших от подобной болезни. У свиней установлена трансплацентарная передача этого вируса. Шт. Kanagava хорошо репродуцируется в культуре клеток хомячка HmLu-1.

Шт. ML-110 вируса Гета индуцирует образование АТ, которые выявляются в РТГА на 4-

5-й, в PH - на 5-6-й, в РСК - на 6-9-й день. АТ достигали максимума в первом случае на 7- 9-й день, во втором - через 2-3 мес, в третьем - через 2-3 нед. Дольше всего (до 6-12 мес) сохранялись в высоком титре ВНА. Выявлена корреляция между титрами 3-х типов АТ (4).

Для обследования свиней на вирус Гета предложен ELISA (3).

СПИСОКЛИТЕРАТУРЫ

1Сергеев В.А. Вирусные вакцины, Киев, Урожай,1993. 2Сюрин В.Н. и др. Частн. вет. вирусол., М, Колос”,1979. 3.Hohdatsu Т. et.al. Jap J Vet Sci, 1990, 52, 4 :835. 4.Jmamagava H. et.al. Bull Eq Res Inst., 1992, 29 :32.