ВОСТОЧНЫЙ АМЕРИКАНСКИЙ ЭНЦЕФАЛОМИЕЛИТ ЛОШАДЕЙ

Восточный американский энцефаломиелит лошадей (ВАЭЛ) - болезнь однокопытных животных, характеризующаяся поражением преимуществен но ЦНС, желтушностью слизистых оболочек и атонией ЖКТ.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. У инфицированных лошадей наблюдается лихорадка и виремия, затем появляются симптомы поражения ЦНС. возбуждение, изменение поведения, сонливость и паралич. Погибает до 20% заболевших. При патологоанатомическом исследовании отмечают деструкцию серого вещества головного мозга.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Вирус выделили в 1933 г. Тен Брук и Меррилом. Позже его выделяли от больных людей, а также от птиц и комаров некоторых видов.

Морфология и химический состав. Размеры вирионов варьируют от 20 до 58 нм, частицы сферической формы.

Устойчивость. Вирус инактивируется в течение 10 мин при 60°С, а также при замораживании и оттаивании и обработке ССЬ, эфиром и дезоксихолатом, сохраняется при -20°С и -70°С. Воздействием азотистой кислотой на инфекционную РНК удавалось получать мелко- бляшечные мутанты, которые отличались от исходного вируса. Воздействие гидроксил амина в условиях pH 6,1 ведет к более быстрой, чем при pH 9,1, инактивации вируса. Вирус ВАЭЛ удается концентрировать центрифугированием в градиенте плотности сахарозы (45%) в течение 2,5 ч при 27000 мин'1, а затем в 30-50% р-ре сахарозы за 20 ч при 24 000 мин1. Данный метод позволяет сохранять 90% инфекционности вируса.

Антигенная структура. Известно, что белок оболочки вируса ВАЭЛ угнетает иммунный ответ здоровых мышей (СВАхС57В1) F на гетеро АГ при внутривенном введении за 24

ч до иммунизации эритроцитами барана (1). Определена топология АГ детерминант, ответственных за проявление ГА активности в генах вируса ВАЭЛ. С помощью панели с 17 образцами монАТ анти-ГА, идентифицирован высококонсервативный С домен, распознаваемый группоспецифическими монАТ, в гене белка Е2 обоих вирусов. Эти монАТ ингибировали агглютинацию следующих альфавирусов: ЗАЭЛ, лесов Семлики, Чикунгунья, Аура, Гета, Синдбис и Пиксина. Определено, что доминанта С-региона ассоциирована с аминокислотными остатками порядковых номеров 59 и 232, что было продемонстрировано при определении нуклеотидной последовательности гена белка Е2 3-х выделенных вариантов венесуэльского энцефаломиелита лошадей (В ЭЛ) (8).

Антигенная активность. В сыворотке крови переболевших лошадей и людей имеются АТ, участвующие в РСК, PH и РЗГА, сравнительная динамика которых не изучена. В антигенном отношении вирус ВАЭЛ выше, чем вирус ЗАЭЛ. В течение 1971 г. наблюдали вспышку энцефалита лошадей в США, при которой из 1982 проб (кровь, мозг, селезенка и др. ткани) от 1551 лошади выделено 76 изолятов вируса ВАЭЛ. Большинство (51,6-76,1%) инфицированных лошадей были из юго-восточных штатов. Изоляты идентифицировали в PH и РСК.

Антигенная вариабельность и родство. Установлено, что штаммы вируса ВАЭЛ, выделенные в отдаленных геофизических районах, в АГ отношении различны. Так, 8 штаммов этого вируса, полученных в США, на Ямайке, в Доминиканской Республике, отнесены к североамериканскому подтипу; другие 8, выделенные в Панаме, Гвинее, Бразилии, Аргентине и на о. Тринидад, - к центрально-южному американскому подтипу.

Выявлено 4 серотипа вируса ВАЭЛ. 1-й тип включает 5 подтипов: 1А, IB, 1C, Ши 1Е. В АГ-отношении вирус ВАЭЛ отличается от вирусов WEE и VEE в РСК, PH на мышах и в культуре клеток. Однако в РЗГА установлено родство его с другими альфавирусами. При пассировании и последующем клонировании вируса в культуре клеток КЭ можно получить АГ различные варианты вируса ВАЭЛ (шт. Агу-В). В этой же системе удалось получить 2 варианта (М и D) вируса, различных по патогенности для мышей и по антигенности в PH на мышах. По иммуногенным свойствам вирус ВАЭЛ больше близок к вирусу В ЭЛ, чем к другим альфавирусам.

Гемагглютинирующие свойства. Для реакции более пригодны эритроциты только что вылупившихся цыплят и утят. Эмбриональный вирус, обработанный сахарозой и ацетоном, повышает Г А активность. Вирус содержит гемолизин, а также интерферирует со многими вирусами, включая альфа-, флави-, миксо- и пикорнавирусы.

Локализация, вирусоносительство и вирусовыделение. У больных лошадей вирус выделяется с секретом носовой полости, мочой, молоком. У лошадей виремия невысокая, и они, вероятно, являются, так же как и люди, тупиком инфекции.

Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится на белых мышах, крысах, морских свинках, кроликах, обезьянах, белках, хлопковых крысах, оленях, козах, овцах, коровах, голубях и цыплятах при интрацеребральной инокуляции вируса. Наиболее чувствительны мышата н 4-5-нед сирийские хомячки. Белые крысы, морские свинки и кролики невосприимчивы к вирусу при периферическом заражении. У мышей болезнь протекает как энцефалит. Инкубационный период 2-3 дня. Поражается ЦНС. Для мышей вирус ВАЭЛ более вирулентен, чем вирусы ЗАЭЛ и ВЭЛ. Вирус высоко патогенен для КЭ. У фазанов и мелких птиц из отряда воробьиных развивается летальное заболевание. Свежевылупившие- ся цыплята (до 12-ч возраста) пригодны для пассирования вируса в лабораторных условиях.

Культивирование. Вирус ВАЭЛ размножается в КЭ, в культуре клеток ФЭК, эмбриона мыши, хомяка, обезьяны, морской свинки, а также в клетках HeLa, индуцируя цитопатиче- ские изменения. Из первично трипсинизированных тканей наиболее пригодна почка хомяка 20-25-дн возраста. Культуру клеток выращивают на среде Игла с добавлением 2% сыворотки хомяка. ЦПД вируса проявляется через 24 ч. В культуре ФЭК он образует бляшки. В некоторых линиях человеческих и куриных клеток при 31°С может развиваться хроническая инфекция. Вирус ВАЭЛ размножается в организме экспериментально зараженных комаров и клещей. Имеются сведения о культивировании вируса в эмбрионах рыб и тканевой культуре измельченных личинок комара Aedes egypti.

Реализация генетической информации тогавирусов происходит в цитоплазме клетки в тесной ассоциации с клеточными мембранами. После инфекции и депротеинизации родительская РНК прикрепляется к мембране, с мембранами ассоциированы также вирусная РНК-полимераза и вирусспецифические полирибосомы.

Сформировавшиеся нуклеокапсиды мигрируют к модифицированным участкам наружной мембраны клетки, в которой клеточные белки заменены вирусспецифическими гликопротеинами. Ассоциация нуклеокапсида с модифицированной мембраной и “одевание” нуклеокапсида происходят в процессе выхода вириона из клетки путем отпочковывания. По- видимому, некоторые структурные полипептиды модифицируются (расщепляются, деглико- зилируются) уже на стадии вириона.