АДЕНОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Bovine Adenoviral Infections (англ.); Adenovirusbedingte respiratorisch- enterale Erkrankung des Kalbes, Pneumo-Enteritis (нем.)

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Болезнь характеризуется поражением органов дыхания, пищеварения (пневмонии, энтериты и пневмоэнтериты) и реже глаз. Чаще болеют телята в возрасте от 2 нед до 4 мес. Инкубационный период длится 4-7 дн. Болезнь проявляется повышением температуры тела до 41,5°С, слезотечением, серозным истечением из носа, кашлем, затрудненным дыханием, тимпанней, коликами, диареей. Истечения из глаз и носа слизистые, а затем слизисто-гнойные или гнойные.

В период острой инфекции у больных снижается аппетит, а некоторые животные отказываются от корма. Течение болезни зависит от условий содержания, кормления и возраста телят. Наиболее остро она протекает у молодняка 15-20-дн возраста. При этом наблюдают общую слабость и понос (фекалии с примесью крови и кусочков слизистой оболочки кишечника). Телята гибнут через 1-3 дн после появления первых симптомов болезни. Среди телят раннего возраста смертность достигает 60%, у телят до 10-дн возраста, получивших с молозивом матери АТ, болезнь клинически не проявляется. Однако они могут инфицироваться, даже если содержат ВНА молозивного происхождения. В течение острой эпизоотии АВ КРС изолируют от 50-80% животных из проб конъюнктивы, носовой полости, миндалин, фекалий. Их также выделяют от телят 1-4-нед возраста с симптомами пневмонии и энтерита. У животных старшего возраста болезнь часто приобретает хроническое течение. Переболевшие телята внешне кажутся здоровыми, но отстают в росте, развитии и долго кашляют.

При вскрытии обнаруживают признаки геморрагического катарального гастроэнтерита, расстройства циркуляции крови, изменения органов дыхания (уплотнение, ателектаз и эмфизему легких). При гистологическом исследовании находят гиперплазию и слущивание бронхиального эпителия; закупорку бронхов некротическими массами; в легких вокруг мелких кровеносных сосудов видно скопление лейкоцитов; в клетках легочной ткани, слизистой оболочки трахеи и бронхов, эндотелиальных клетках тонких сосудов, в клетках лимфоузлов, почек, печени, селезенки, сердца, слизистой оболочки желудка и кишечника - внутриядерные включения.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Вирус впервые был обнаружен в 1959 г. в США .

АВ КРС различаются по ряду свойств, в т.ч. и по морфологии включений, что послужило основанием для разделения их на 2 подгруппы (19). В клетках, инфицированных вирусами 1-й подгруппы (типы 1, 2 и 3), выявляют полиморфные базофильные образования (мелкозернистые, гранулярные), превращающиеся в одно грубое ядерное базофильное включение. При флюорохромировании акридином оранжевым выявляли яркое зеленое свечение. Вирусы 2-й подгруппы (типы 4, 5, 6, 7 и 8) индуцируют образование множественных эозинофильных включений правильной округлой формы, которые увеличиваются в объеме, количество их снижается до 1-3. Только некоторые из них на поздних стадиях становятся слабо базофильными. На 5-е сут после заражения многие из инфицированных клеток дегенерируют, но даже в таких клетках включения часто сохраняются. При флюорохромировании акридином оранжевым включения флюоресцируют слабо, но они более четко видны как округлые светло-зеленые образования. Подтверждено четкое морфологическое различие включений, образующихся при репродукции 1-й и 2-й подгрупп АВ КРС. Метод отличается большой чувствительностью, простотой и быстротой приготовления препаратов (9,10).

Устойчивость. АВ КРС устойчивы к физико-химическим воздействиям, трипсину, эфиру, хлороформу, сапонину, дезоксихолату натрия и 50%-ному этиловому спирту.

3%. Обработка хлороформом повышает его инфекционный титр на 0,5 1& АВ инактивируются при температуре 56°С за 30-60 мин. Прогревание при 56°С приводило к полной инактивации эталонного шт. Рикиго1 через 30 мин, а изолятов - через 2 ч. В условиях 70°С шт. Рикиго1 полностью инактивировался через 10 мин, а полевые изоляты - через 30 мин. При 4° С все изучаемые вирусы сохраняли инфекционную активность в течение 90 дн. При 24°С в течение 2 мес титр вируса постепенно снижался на 1 Таким образом, при 56 и 70°С была установлена большая терморезистентность свежевыделенных изолятов по сравнению с эталонным штаммом. Этн данные учитывают при изучении кинетики инактивации вирусов и условий хранения вируссодержащего сырья в технологическом процессе изготовления (9). АВ КРС устойчивы к изменению pH среды (3-9) в течение 3 ч при комнатной температуре, полностью инактивируются УФ лучами за 30-60 мин. Они длительно хранятся при -30°С, при 4°С - более 6 мес, при комнатной температуре - 1-4 мес н при 36°С - 15-60 дн; устойчивы к повторному замораживанию и оттаиванию, хорошо сохраняются при pH 6- 9 и переносят сушку.

АГ структура. При репродукции АВ, помимо зрелых форм в клетках образуются неинфекционные растворимые АГ, которые накапливаются в больших концентрациях при относительно малом содержании инфекционного вируса. Различают АГ 3-х видов: А, В, С. АГ А группоспецифичен, при иммунизации он стимулирует образование группоспецифических КСА, ПА н АТ, реагирующих в РНГ А. Кроме того, стимулирует образование ВНА против гомологичного вируса. АГ В - белковый компонент, токсичный фактор, ответственен за ранний ЦПЭ. АГ С типоспецифичен, при иммунизации индуцирует выработку только тнпоспецифических АТ, выявляемых в PH и РНГ А.

Указанные АГ различаются не только по АГ специфичности, но и по локализации в ви- рионе. АГ А связан с гексонами, В - с пентонами и С - с филаментозными структурами вирусного капсида.

Вирусы 1-й подгруппы содержат в гексоне родоспецифическую детерминанту альфа, общую для АВ млекопитающих, а у АВ 2-й подгруппы такой детерминанты ранее не обнаруживали.

АГ вариабельность и родство. Шт. АВ КРС подтипов 1, 2 и 3 имеют общий КС АГ.

Экспериментальная инфекция. Воспроизводится только на телятах 15-30-дн возраста. У больных животных развиваются пневмоэнтериты при явлениях общей слабости, летальность может достигать 60%. У животных старшего возраста болезнь протекает хронически. Изоляты, выделенные от больных телят, поражают респираторно-кишечный тракт. При сравнительном изучении серотипов 1, 2 н 3 АВ доказано, что наиболее патогенен для телят тнп З (1,11).

Культивирование. Культуры клеток - единственная биологическая система для репродукции АВ КРС. Наиболее чувствительны ПЭК, ТБ. Реже используют ЛЭК и ПТ. На основании различий в культуральных свойствах отдельных серотипов КРС и характера вызываемых ими цитоморфологических изменений их делят на 2 подгруппы. 1-я подгруппа включает шт., относящиеся к серотипам 1, 2 и 3, которые размножаются на ПЭК, ЛЭК и ТБ, а иногда на гетерологических культурах почки других животных. Представители этой подгруппы обычно индуцируют одно ядерное включение неправильной формы. В процессе размножения их развиваются характерные ЦПИ, время наступления которых зависит от вида клеток, штамма вируса и его заражающей дозы.

2-я подгруппа включает шт., относящиеся к серотипам 4, 5 и 6, а также шт. Нагано, Рики г оі н Вії. ЭТИ штаммы хорошо репродуцируются в культуре клеток ЛЭК, медленно - в культуре клеток ТБ (ЦПИ проявляются лишь на 5-7-е сут после заражения) и совсем не размножаются в культуре клеток ПЭК. Представители этой подгруппы продуцируют множественные внутриядерные включеній правильной округлой формы.

В последние годы предложена новая биологическая система для культивирования АВ КРС - перевиваемая линия клеток почки теленка (Т1).

ГА свойства. ГА-активность штаммов АВ КРС неодинакова. Она зависит от вида и концентрации эритроцитов, температуры и pH среды. Шт. WBR-50 и Bovine-Ю (серотип1) АГ эритроциты белых крыс в титрах 1:32 - 1:256, но не АГ эритроциты белых мышей. Шт. Bovine-19 (серотип 2) АГ эритроциты белых крыс и эритроциты мышей в титре 1:2. Более четкие результаты ГА отмечены при температуре 4°С и использовании 1,5%-ной взвеси эритроцитов. Шт. серотипов 3, 4 и 5, ранее считавшиеся негемагглютинирующими, после концентрации приобретают это свойство в отношении эритроцитов белых крыс. Шт. 671130 (серотип 6) г негемагглютинирующий. АВ КРС обьино не АГ эритроциты морских свинок, кур, овец и человека, однако японские шт. Нагано и Fukuroi АГ эритроциты белых крыс, мышей, овец, коз, морских свинок, коров и хомячков при 4°С и не реагируют с эритроцитами обезьян, лошадей, кур и гусей. Шт. WBR-1 не агглютинирует эритроциты ни одного из указанных видов животных. Спектр ГА активности многих шт. АВ КРС, выделенных в различных странах мира, ещё не изучен.

ГАд свойства не установлены.

Онкогенные свойства. При введении грызунам АВ вызывают развитие опухолей, но из опухолей, в которых обнаруживаются вирусные АГ, выделить вирус не удавалось. АВ человека, разделенные по биологическим подгруппам, обладают разной онкогенной способностью. Онкогенные свойства обнаружены и у некоторых шт. бычьих АВ (у шт. WBR-1 для новорожденных хомячков). Опухоли, индуцируемые у хомячков бычьим АВ типа 3, по онкологическим характеристикам были сходны со спонтанными новообразованиями: имели низкую степень дифференцировки, высокую скорость клеточного роста, пониженную адге- зивность и высокую туморогенность. Бычий АВ типа 3 - единственный ДНК- содержащий вирус КРС, индуцирующий злокачественные неоплазии у лабораторных животных.

Интерфероногенные свойства. У АВ КРС не изучены;'Однако все 12 испытанных серотипов АВ человека индуцируют образование интерферона в культуре фибробластов КЭ.