<<
>>

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

Объектом исследования служили разные по устойчивости к регуляторным гербицидам сорта льна-долгунца: устойчивые Светоч и 1288/12 н чувствительные Л-1120 и Вайжгантас. Анализу подвергались различные части прорастающих семян.

Семена проращивали в чашках Петри на фильтровальной бумаге, смоченной растворами 2М-4Х и 2,4-Д в концентрациях 10“4 и 10“5%. После суточного выдерживания в термостате при температуре 24—25° готовили срезы на замораживающем микротоме по 5—10 срезов у каждого семени. Толщина срезов 60 мк. В каждом варианте анализировалось по 5 семян.

Содержание и распределение триптофана определяли реакцией Ромье [25]. Контрольные срезы обрабатывали по Пирсу

  1. с целью блокирования концевых групп белков. Содержание ИУК изучали по методу Сальковского в модификации Бояркина
  2. .              Смесь концентрированной Нг304 и аммиачных квасцов брали в отношении 1:1. Контрольные препараты промывали водой в течение 6 час. или 1 н. НС1 в течение 3 час. [28].

Для определения нуклеиновых кислот срезы из нефиксированного материала окрашивали смесью метилового зеленого с пиронином в течение 6 мин., промывали дистиллированной водой, просушивали и проводили последовательно через ацетон, ацетон — ксилол (10:1), ацетон — ксилол (1:1) и ксилол [29]. Краситель готовили по прописи Тревана и Шаррока [30] с использованием пиронина Ш. Метиловый зеленый и ппронин предварительно промывали хлороформом для удаления примесей. ДНК определяли с помощью реакции Фельгена [26]. Фуксин- сернистую кислоту готовили по способу Томази, и срезы инкубировали в течение 1,5 час. с предварительным 6-мшгутным гидролизом в 1 н. НС1. Нуклеиновые кислоты в клетках определяли по Конареву [31], сочетая обработку срезов рибонуклеазой и

  1. и. НС1. Рибонуклеазу готовили по Роскину и Левинсону [25].

Перокспдазу определяли действием основного бензидина п перекиси водорода [32], а полифенолы — реакцией ГеС1з+ + К3[Ре(С1\')б] (смесь равных объемов 1%-ных водных растворов) и ванилиновым реактивом [33].

Содержание определяемых веществ оценивалось визуально по пятибалльной системе: 0 — отсутствие, 1—следы, 1-—небольшое количество, 3 — среднее количество, 4 — большое количество и 5 — очень большое количество. В случае ДНК учитывали не только интенсивность окраски и размер ядер, но и число последних на единицу площади. На рисунках приведены средние данные по различным частям прорастающих семян.

<< | >>
Источник: Метлицкий Л.В. (ред). Биохимические основы защиты растений. 1966

Еще по теме МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА:

  1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА
  2. Глава II МЕТОДИКА
  3. Методика гальванизации.
  4. МАТЕРИАЛ И МЕТОД
  5. Методика проведения процедур
  6. Методика обработки траекторий.
  7. 6.7. Основы методики изучения структуры популяций
  8. Методика отлова и содержания молодняка сайгаков
  9. МЕТОДИКА ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ ГИДРОМЕЛИОРАЦИИНА СУХОДОЛЬНЫЕ НАСАЖДЕНИЯ
  10. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ
  11. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ
  12. Фиксация растительного материала
  13. МАТЕРИАЛ И МЕТОД
  14. методика экспериментальных исследований АГРЕГАЦИИ ПОЧВЕННЫХ ЧАСТИЦ
  15. МАТЕРИАЛ И МЕТОД
  16. МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЛЕЧЕБНЫХ ПРОЦЕДУР ПРИ СИМПТОМАТИЧЕСКОМ БЕСПЛОДИИ
  17. МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЛЕЧЕБНЫХ ПРОЦЕДУР ПРИ СИМПТОМАТИЧЕСКОМ БЕСПЛОДИИ
  18. 3.5.5. Биологическое значение хромосомного уровня организации наследственного материала
  19. Изучение культуральных свойств выделенного патологического материала.