ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

В последние годы выражена тенденция к разработке и широкому внедрению вакцин нового поколения как инактивированных, так и синтетических. Такого рода вакцины по сравнению с традиционными обладают следующими преимуществами: 1) индуцируют биологически полноценный иммунитет, не уступающий постинфекционному; 2) лишены инфекционного начала и тем самым снимается вопрос о генетическом загрязнении биосферы при массовом их применении (66). Для специфической профилактики БА применяются инакти- вированые, цельновирионные живые (из аттенуированных штаммов) вакцины: субъединичные и генно-инженерные (делетинированные).

Живые вакцины. Для приготовления живых вакцин используют аттенуированные штаммы вируса различного происхождения. Их получали серийным пассированием в первичных и перевиваемых культурах при различных температурах (37 и 28°С) или в присутствии мутагенов. Полученные аттенуированные штаммы различаются между собой многими признаками и в том числе патогенностью для лабораторных животных. Так, в Болгарии применяют живую вакцину из шт. Русс, а также из вируса, адаптированного к организму морских свинок (МК-25), в Югославии - из вируса, адаптированного к КЭ и дополнительно ослабленного пассажами на крысах. В Чехословакии получен вакцинный шт. BUK в результате длительных пассажей на КЭ (366 пассажей). Вирус не патогенен для телят при периферическом заражении, при внутримышечном заражении кроликов вызывает смерть без признаков зуда. Утрата способности вызывать у кроликов зуд, образовывать крупные бляшки в культуре клеток КЭ - важный генетический признак шт. БУК. В Венгрии применяют живую вакцину из штамма Барта, который получен отбором мелкобляшечного клона в культуре клеток почки свиньи с последующей аттенуацией в клетках линии Vero.

В России и странах СНГ применяют живую вирусвакцину ВГНКИ из штамма, аттенуированного в фибробластах КЭ, а также вакцину из штамма БУК628. Препарат из производственного шт. УНИИЭВ-18 вс оказался универсальным и рекомендован для иммунизации животных многих видов(свиней, КРС, овец, верблюдов и пушных зверей - норка, кролик). Последний является высокоиммуногенным для КРС, овец, верблюдов (14,16,18,19). Молозивные АТ препятствуют приживлению вакцинного вируса и снижают эффективность живой вакцииы у поросят. Интерференцию между пассивными материнскими АТ и вакцинным вирусом в значительной мере можно преодолеть интраназальным введением живой вакцины. У поросят с низким уровнем материнских АТ интраназальная вакцинация живой вакциной оказалась более эффективной, чем парентеральное введение инактивированной вакцины. Живая вакцина не предотвращала проникновение патогенного штамма вируса в мозг поросят при интраназальном заражении.

Вакцинный штамм ВБА отличается от вирулентного тем, что в нем экспрессирован гликопротеин gl. Сравнительный анализ многих аттенуированных и “диких” штаммов вируса показал, что первые имеют множественные дефекты в трех участках генома, которые, однако, не влияют на уровень их репродукции в культуре клеток (74а, 74Ь).

Инактивированные вакцины. С 1980 г. в Российской Федерации и странах СНГ применяется инактивированная культуральная вакцина против БА пушных зверей, свиней, овец. Вакцина безвредна, сообщает иммунитет с 8-10-го дн после прививки, у пушных зверей он сохраняется не менее 6 мес, у свиней и овец - 10 мес. Разработана новая высокоим- муногенная инактивированная культуральная вакцина против БА поросят, овец и пушных зверей из вируса, репродуцированного на перевиваемых клетках СПЭВ (26ав). Вакцина не содержит живого вируса, экологически безопасна, не уступает по профилактической активности вирус вакцине и не искажает эпизоотический фои в хозяйствах. Технология изготовления вакцины заключается в использовании высоковирулентного культурального ВБА (шт. 18-Е), выращенного в монослое перевиваемых клеток СПЭВ, адсорбированного на ГОА, инактивированного с помощью формалина и тепла.

Инактивированные вакцины обеспечивают создание в крови высоких концентраций антител. Эти антитела через молозиво передаются потомству. Однако клеточный иммунитет от инактивированных вакцин активируется в меньшей степени, чем от живых. Напротив, живые вакцины обеспечивают напряженный клеточный иммунитет и относительно слабый гуморальный иммунитет. Таким образом, иммунизация супоросных свиноматок инактивированные вакцинами обеспечивает защиту поросят раннего возраста, а для поросят- отъемышей и откормочных свиней лучшая защита обеспечивается живыми вакцинами (30).

Разработано современное представление об иммуногенезе БА, роли вирусоносительства у свиней и доказана возможность промышленного культивирования вируса на перевиваемых линиях клеток. Созданы качественный метод контроля вакцин на сельскохозяйственных животных и пушных зверях и новые представления о принципах, которые должны учитываться при определении вирулентности ВБА (9,14,16,18,19,110а).

Инактивированные вакцины, приготовленные иа основе маркированных шт. Bartha и 77/3, обладали выраженной иммуногенностью и не уступали вакцинам на основе gl піт. ВБА БУК, ВГНКИ и К (23). Разработана и испытана на разных животных инактивированная эмульсионная вакцина против БА из вируса, репродуцированного в суспензии клеток ВНК 21/2-17 (14, 16, 18, 19). Живая вирус-вакцина не создавала напряженного иммунитета против БА у верблюдов, хотя была эффективной для свиней. Поэтому для верблюдов использовали эмульсионнную инактивированную вакцину ВНИЯИ-УНИИЭВ, что позволило локализовать БА (3, 7, 6, 14, 16, 18, 19).

Субъединичные вакцины. Во Франции разработана и успешно применяется субъединичная вакцина (109). Её готовят из 2-х шт.: вирулентного, без делеций (+) и мутанта с де- лециями структурных гликопротеинов gl и gp63(gl-). Очищенные гликопротеины диспергируют в водно-масляной эмульсии и применяют внутримышечно. Обе вакцины оказались безопасными и высокоиммуногенными. Защита потомства, рожденного от свиноматок, вакцинированных препаратами (+) или (-), составляла 93 и 92% соответственно. В группе поросят, рожденных от невакцинированных свиней, гибель после заражения вирусом составляла 98%. Отсутствие в вакцине gl и gp 63 не влияет на иммуногениость препарата.

В Венгрии предложена субъединичная вакцина в виде иммуностимулирующего комплекса (ИСКОМ), содержащего белки оболочки ВБА. Применение её позволяет дифференцировать вакцинированных ИСКОМ-ом животных от животных, естественно инфицированных ВБА (87). Первую в России экспериментальную субъединичную вакцину против БА готовили из инфицированных клеток, обрабатываемых 0,5%-ным трилоном Х-100 (1:4) при 4°С в течение 90 мин. К гликопротеину надосадочной жидкости после центрифугирования (lOOOOOg, 60 мин) добавляли неполный адъювант Фрейнда и использовали как субъединичную вакцину. Вакцинация индуцировала развитие клеточного иммунитета. Эффективную вакцину против БА готовили из инфицированных клеток РК-15 (1,1а1 18,20).

Рекомбинантные вакцины. Сконструированы аттенуированные варианты ВБА, сохранившие способность к репликации, но имеющие делеции в некоторых несущественных областях генома: гене ТК, гене гликопротеина gpX или в повторяющейся области.

Методом генной инженерии из шт. Бухарест ВБА получен штамм, лишенный генов, который регулирует синтез тимидинкиназы главного гликопротеина gill и минорного гликопротеина gl. Полученный штамм репродуцировался в культуре фибробластов кожи кроликов при 30-39°С, обладал аттенуированным фенотипом, сохранял иммуногенные свойства. Делеции в генах тимидинкиназы и гликопротеинов gill, gl и gX (90 кД) сопровождался снижением иммунопатологических реакций и персистированием вируса (69а). Получены мутанты ВБА, в составе которых отсутствуют 3 (gl, gp63, gill) или 4 (gl, gp63, gill, gX) несущественных гликопротеина, не влияющих на его репродукцию в культуре (85а). Делегированный по гену цХ вакцинный штамм ВБА имел преимущества по сравнению со штаммами, имеющими делецию в гене ф.. Гены ?р50 Ь gp63 ВБА шт. Индиана-Фунихаузер под контролем промотора р7,5 вируса осповакцины были рекомбинированы в ген тимидинкина- зы вируса оспы свиней шт. Казца путем трансфекции, инактивирующей ген ТК. Полученную вакцину вводили свиньям путем скарификации или внутримышечно. Спустя 3 нед у 90- 100% обнаруживались АТ к ВБА. В течение 150 дн выявлялись ВНА (73а).

Рекомбинацию аттенуированных штаммов ВБА отмечали в организме вакцинированных животных с возникновением новых вирулентных штаммов, представляющих практическую опасность (67а). Лучшим кандидатом на роль вакцинного штамма оказался рекомбинат 5-РЯУ-013, имеющий 3 делеции (в геиах ТК, ?рХ и в повторяющейся области) и несущий ген Р-галактозидазы. Свиней, иммунизированных аттенуированными вирусами БА, можно отличить от животных, зараженных природным вирусом, используя 2 критерия: 1) отсутствие антигена ?рХ при наличии некоторых других АГ вируса и 2) экспрессию АГ р- галактозидазы (39,40,102). Запатентовано получение рекомбииатной ДНК, содержащей последовательности, кодирующие гликопротеииы ВБА ?1,?р50, ?р63, которая может быть использована для получения субьединичных вакцин, разработки метода защиты животных и метода дифференциации вакцинированных и инфицированных животных (95а). С аналогичной целью можно использовать субъёдиничную вакцину из шт. ВайЬа (96а).

Применение живых и инактивированных вакцин. При вакцинации животных против БА необходимо учитывать следующее. Во-первых, календарь прививок зависит от благополучия стада и технологии ведения свиноводства в хозяйстве. При возникновении болезни или угрозе заражения необходимо вакцинировать всех животных. Во-вторых, инактивированными вакцинами прививают свиноматок 2-кратно с таким расчетом, чтобы добиться максимального уровня колостральной защиты потомства, т.е. в средней и последней третях беременности. В последующем вакцинируют однократно в каждую беременность. В- третьих, весь ремонтный молодняк к 3-3,5-мес возрасту должен быть привит 2-кратио. Инактивированными вакцинами можно прививать поросят и от иммунных матерей.

Интраназальная и парентеральная вакцинация не предотвращает латентного носитель- ства вирулентного штамма вируса в миндалинах, хотя сокращает сроки его выделения во внешнюю среду, особенно после двукратной или интраназальной иммунизации. В стационарно неблагополучных по БА зонах основной проблемой применения живых вакцин является материнский иммунитет. У поросят, полученных от 2-кратно вакцинированных матерей, выраженный пассивный иммунитет длится ие менее 4-5 нед и препятствует выработке поствакцинального иммунитета. С другой стороны, введение в этот период вакцинного вируса может ослабить пассивный (материнский) иммунитет. Поросята с низким и высоким уровнями материнских АТ оказываются лучше защищенными после интраназальной вакцинации, чем после 1- или 2-кратной парентеральной вакцинации (22). Свиноматок обычно прививают за месяц до осеменения, а поросят, полученных от них, в 3-12-иед возрасте. Повторно поросят вакцинируют через 3-6 мес. Результаты вакцинации зависят от дозы вакцины и кратности введения. Многократная вакцинация поросят в стационарно неблагополучных хозяйствах в сочетании с изолированным их содержанием после отъема может способствовать приостановлению персистенции вируса.

Живая вакцина оказалась недостаточно эффективной при применении на КРС. Показано, что внугрикожная безыгольная вакцинация свиней более удобна по сравнению с внутримышечной: животные могут быть вакцинированы во время кормления, и подтверждением вакцинации служит наличие папулы на месте инокуляции (110), кроме того, приемлемой может быть аэрозольная вакцинация поголовья (38а).

В настоящее время имеется много сообщений о разработке нового типа вакцин против БА, совместимых с программой искоренения инфекции (32, 43, 66). Необходимость в разработке более совершенных вакцин против БА велика. Эго связано с тем, что с помощью традиционных вакцин нельзя искоренить названную инфекцию. Можно лишь снизить эконо-' мические потери от острой формы болезни. Эго подтверждает многолетний опыт ряда европейских стран, где, несмотря на вакцинацию свиней, увеличилось число вспышек и расширилась, а не уменьшилась территория, пораженная Б А. Главная сложность борьбы с болезнью состоит в том, что она часто протекает в латентной, скрытой форме, при которой вирус находится в клетках ЦНС и отсутствует в крови. Вследствие этого он недоступен для АТ и не обнаруживается обычными серологическими методами. Вирус может находиться в латентном состоянии в течение всей жизни животного. При снижении защитных сил организма, под действием стресс факторов (опорос, транспортировка, переохлаяодение и т.п.) вирус реактивируется, размножается и вызывает клиническую форму болезни. Основные недостатки традиционных вакцин заключаются в том, что использование живых вакцин способствует развитию латентной формы болезни, так как они стимулируют образование не стерильного иммунитета (животные не освобождаются от вируса). Страны, неблагополучные по БА, терпят значительный экономический ущерб. Специалисты развитых стран считают, что освободить хозяйство или страну от болезни можно только путем искоренения, уничтожения вирусоносителей или всего поголовья пораженного стада в зависимости от условий. В настоящее время странами ЕЭС и США принято решение об искоренении БА. Однако в сильно пораженных хозяйствах, где нет условий для одновременного убоя всего стада, для предотвращения вспышек болезни владельцы животных вынуждены использовать вакцины. Традиционные живые вакцины не совместимы с искоренением инфекции по названной выше причине и потому, что серологическими методами нельзя отличить вакцинированное животное от естественно зараженного полевым вирусом.

За последние 10 лет учеными получены вакцины нового типа, которые совместимы с программой искоренения, так как лишены недостатков традиционных вакцин. Был определен ген латентности вируса, т.е. ген, кодирующий синтез фермента ТК. Этот фермент необходим вирусу для размножения в ЦНС. Поэтому у вируса генно-инженерными методами удалили ген ТК, тем самым лишив его способности размножаться и, следовательно, быть латентным. Для того, чтобы серологически отличать вакцинированных от естественно зараженных животных, у вакцинного вируса удаляют еще один ген, ответственный за синтез какого-либо из гликопротеинов оболочки вируса (у данного вида вируса их приблизительно 30). Гены иммуногенных гликопротеинов, стимулирующих выработку ВНА, не удаляют. С помощью тест наборов, диагностикумов, работающих по принципу ИФА, не обнаруживают АТ к гликопротеину удаленного гена. Отсутствие таких АТ в сыворотке крови свидетельствует о том, что животное вакцинировано, наличие - инфицировано полевым вирусом. Первая вакцина против БА из вируса с удаленными генами разработана в медицинском колледже в Хьюстоне (США) и произведена для продажи фирмой Nova Gena Inc. под названием Omnivac-PRV. С 1986 г. в этой стране использовано более 10 млн. доз вакцины без ка- ких-либо отрицательных последствий. Вакцина содержит живой ВБА, у которого удален ген ТК и маркерный (для серологической дифференциации) ген g-I. Названный гликопротеин имеется у всех штаммов ВБА, по крайней мере у 250 исследованных на 3-х континентах. Ученые предполагают, что он способствует проникновению вируса в клетки животного и распространению его из места попадания в ЦНС, т.е. связан с инфекционностью. Главные преимущества этой и других вакцин без ТК-гена перед традиционными заключаются в том, что их вирус, вследствие неспособности к размножению, не становится латентным и не приобретает патогенных свойств. Вакцина настолько безопасна, что её можно вводить животным на любой стадии супоросности. Вероятно патогенность частично обусловлена отсутствием гена g-I. Эффективность вакцины также высока. Примером её эффективности являются результаты опытов, в которых использовали 100 мл инфекционных доз вакцины на одного поросенка. Вакцинированных животных заражали патогенным ВБА более чем 500 млн инфекционных доз. Ни в одном случае не развивались клинические признаки болезни. В то время как обычно введение 10 тыс. инфекционных доз патогенного штамма вируса вызывает падеж поросят в течение 3-5 дн. Вакцину Omnivac-PRV без адъюванта применяют внутримышечно (57). После одной инъекции иммунитет сохраняется, как минимум, в течение 248 дн. Животных вакцинируют 1 раз, (без повтора через 3 нед, как это требуется при использовании традиционных вакцин). Уже в 1984 г. в США было получено 5 вариантов такого типа вакцин. В частности, Nova Gene Inc. разработала вакцину Omnivac-II, вирус которой лишен 2 генов: ТК и g-92. Фирмой Fermenta Animal Health Со получена вакцина Omni Mark без трех генов-ТК, gl и gill. Недавно установлено, что gill выполняет несколько функций, связанных с адсорбцией и освобождением вируса от клеток. Фирма Upjon Со в Каламазу, штат Мичиган, разработала, а фирма Diamond Scientific Со, штат Айова, производит и продает разрешенную к использованию вакцину под названием Tolvid. Она так же, как и перечисленные dsit, содержит живой непатогенный вирус, без ТК-гена. Кроме того, у вируса иякпины Tolvid удален ген, кодирующий синтез гликопротеина х (gx), функция которого пока не выяснена. К gx образуются высокие титры АТ, не обладающих нейтрализующей активностью в отношении вируса БА. По отсутствию АТ в сыворотке крови отличают животных, вакцинированных данной вакциной, от животных, зараженных вирусом любого другого штамма. Результаты испытаний, проведенных в Нидерландах, свидетельствуют о высокой её эффективности. После однократной инъекции поросятам, имеющим родительские АТ, вакцина защищала их в течение всего периода откорма.

Аналогичную вакцину, названную PRV-Marke, без ТК и X генов выпускает фирма Sytro Vet Inc, штат Канзас. Американская вакцина PRV-Marker - первая из одобренных к применению вакцин, которая выпускается в комплексе с диагностическим набором Herd Chek, содержащим монАТ к gx. С помощью этого тест набора можно дифференцировать животных, вакцинированных PRV-Marker и Tolvid вакцинами от естественно зараженных. Однако узнать, какая из этих 2 вакцин введена тому или иному животному, невозможно, поскольку обе вакцины имеют одинаковый маркер (метку), т.е. их вирусы не имеют gx, так как удален ген, “отвечающий” за синтез этого протеина. Названный диагностический набор выявляет только тех животных, в крови которых есть АТ к вирусу с gx. Фирма Sytro Vet выпускает вторую, тоже разрешенную к использованию вакцину, у вируса которой удалены три гена и один добавлен (“встроен”). Удален ТК-ген, “перевернут” в обратном направлении другой ген для большого ослабления вируса, удален ген, кодирующий синтез gx для дифференциации вакцинированных и зараженных полевым вирусом животных. “Встроен”, т.е. включен в вирус, маркерный ген, кодирующий образование лактазы. По АТ к этому ферменту различают животных, вакцинированных данной вакциной, от животных, инъецированных аналогичного типа вакцинами с удаленным другим маркерным геном. Кроме перечисленных имеются 2 вакцины из вирусов с удаленными генами только гликопротеинов оболочки: gl и gl+g63. Вакцина gl-негативная получена и в Нидерландах в ветеринарном институте в Jle- листаде. Их использование, в отличие от традиционных, также позволяет дифференцировать вакцинированных и естественно зараженных животных. Однако вакцины из вируса без ТК- гена в настоящее время являются лучшими против БА. Они имеют значительные преимущества как перед традиционными и субъединичными, так и перед генетически измененными, без генов гликопротеинов оболочки, но имеющими ТК-ген. О достоинствах вакцин без ТК-гена в сравнении с традиционными уже сказано. ТК-негативные вакцины абсолютно безопасны в отличие от ТК-позитивных (55). В Болгарии используется вакцина против БА МК-35 G(-) ТК(-) (5). Недавно запатентован метод получения рекомбинантной ДНК, содержащей последовательности, кодирующие гликопротеин gpl, gp50, gp63 (115).

Таким образом, полученные в США и других странах вакцины нового типа позволяют радикально повысить надежность и эффективность искоренения БА. В случае необходимости, в угрожаемой зоне, их можно применять в благополучных по этой болезни хозяйствах на животных любого возраста и всех стадий супоросности, не опасаясь за состояние их здоровья и возможность распространить вирус. Принципиальная разница между вакцинами нового типа и традиционными в том, что они содержат вирус, у которого удален ген фермента ТК. Без этого фермента, специфичного для ВБА, вирус не может размножаться. Вследствие чего он не достигает клеток ЦНС и не образует латентную (скрытую) форму болезни. Неспособность к латентности таких вакцин является важнейшим преимуществом их перед живыми традиционными и вирус вакцинами без генов оболочечных гликопротеинов.

Для дифференциации животных, вакцинированных и естественно зараженных, у вируса, кроме гена ТК, удаляют ген гликопротенна оболочки. По отсутствию в сыворотке крови АТ к гликопротеину удаленного гена определяют вакцинированное, по наличию АТ - естественно зараженное животное. В результате введения традиционных вакцин различить серо- логически эти 2 категории животных невозможно (58).

ТК-негативные вакцины эффективнее и несравнимо дешевле субъединичных. Они незначительно дороже традиционных вакцин. В настоящее время такие вакцины являются наилучшими против БА. В США из 5 полученных вакцин нового типа 4 разрешены Министерством сельского хозяйства к использованию. В программах ЕЭС и США по искоренению БА будут использованы только ТК-негативные вакцины.

Оценка поствакцинального иммунитета

Сроки обнаружения поствакцинальных антител. Выявлена четкая зависимость между клиническими проявлениями заболевания у свиноматки и титром АТ в сыворотке крови и молозиве ее (63, 64). У поросят 7-дн возраста, вакцинированных аттенуированным штаммом вируса, ВНА появляются на 14-й день, повышение титра их наблюдается на 21-28-й день после прививки. ВНА после прививок живыми вакцинами и ревакцинации появляются на 7-е сут, накапливаются в достаточно высоких титрах и уже к 14-м сут достигают оптимального уровня. Показано, что только при 2-х этапной вакцинации, вначале инактивированной, а затем живой вакцинами, происходит резкое возрастание титра ВНА с 1,5-2 до 11,

3-12 log2. После однократной иммунизации свиней инактивированной вакциной через 3 нед титры ВНА достигали 11 log2. Уровень титров поствакцинальных антител не коррелировал с защитой от инфекции. При БА необходимо больше внимания уделять определению местного иммунного ответа, в частности слизистых оболочек респираторного тракта.

ИФА можно выявить АТ против гликопротеина I (gl) ВБА (gl-ELISA) и дифференцировать зараженных псевдобешенством свиней от животных, иммунизированных маркерной вакциной (gl). Полагают, что регулярное (и повсеместное) применение ИФА может способствовать эффективности программы по искоренению БА на свинофермах (86). PH и НИФА можно использовать для определения иммунного и эпизоотического статуса по БА и ретроспективного подтверждения циркуляции среди свиней вирулентного вируса. При обнаружении в крови свиней АТ в титрах 3 log2 и более по данным PH (или непрямой ИФА) хозяйство считают неблагополучным по БА и проводят комплекс мероприятий по ликвидации этой болезни (7). Специфические КСА и ПА против БА обнаруживаются у вакцинированных ви- русвакциной из шт. ВГНКИ животных (свиней) на 7-10-й день после иммунизации. Наибольшие титры КСА - 1:16-1:32 были на 21-30-е сут. У поросят-сосунов, полученных от иммунизированных свиноматок, АТ в РСК и РДП обнаруживаются на 5-7-й день их жизни в титре 1:2-1:4. Результаты выявления АТ в РДП коррелируют с таковыми в РСК, однако титры их ниже. Таким образом, показана возможность использования РСК и РДП для налаживания системы иммунологического мониторинга при БА свиней (26).

Длительность циркуляции поствакцинальных антител. Однократная иммунизация поросят инактивированной эмульгированной масляной вакциной вызывала напряженный гуморальный иммунитет (титр до 1:512 в PH) продолжительностью 29 нед и более. Наличие остаточных колостральных АТ у 8-нед поросят не снижало уровень поствакцинального иммунитета. В сыворотке крови поросят, родившихся от свиноматок, привитых живой вакциной, колостральные АТ не выявляли после 5 нед, в То же время в сыворотке поросят от свиноматок, вакцинированных инактивированной вакциной, их обнаруживали после 10 нед. Наиболее существенные различия гуморального иммунитета у вакцинированных и зараженных животных отмечали на 18-й день после введения вируса; у инфицированных свиней как в сыворотке крови, так и в мазках выявляли специфические иммуноглобулины всех классов, в то время как у вакцинированных животных только IgG. Различия в выработке АТ классов IgG, IgM, IgA к ВБА установлены с помощью 4-слойного ИФА.

Колостральный иммунитет. Колостральиый иммунитет при БА имеет огромное значение. У вакцинированных свиней титр молозивных АТ в день опороса составлял 1:128 - 1:256, хотя в сыворотке крови их титр (в PH) не превышал 1:64. У их потомков на 2-й день после рождения титр АТ в сыворотке крови достигал уровня 1:16- 1:128.

Связь титров антител с резистентностью. Между напряженностью иммунитета и высотой титров ВНА корреляции не установлено. Экспериментально определено, что титр ВНА ие коррелирует с устойчивостью к вирулентному вирусу. Устойчивость может быть у животных, не имеющих АТ. Все поросята с титром материнских АТ 1:387 и выше оказались устойчивы к иитраиазальному заражению большой дозой вируса, тогда как АТ в титре 1:264 -

1:344 предохраняли лишь 2/3 потомства. Однократная иммунизация серонегативиых поросят вызывала напряженный гуморальный иммунный ответ (титр АТ до 1:5120 в ELIS А) продолжительностью 29 нед и более. Через 18 нед 80% иммунизированных поросят были устойчивы к контрольному внутримозговому заражению вирулентным штаммом вируса, а устойчивость к контрольному интраназальному заражению сохранялась свыше 20 нед.

Связь титров антител с вирусоиосительством и вирусовыделением. Вирулентный вирус может персистировать у клинически здоровых свиней даже после вакцинации и при наличии специфических АТ до 10 мес. После контрольного заражения у вакцинированных подсвинков с максимальными титрами АТ выделяли вирус в титре до 2,5 lg ТЦД50/МЛ. АТ не препятствуют длительному сохранению вируса в ганглиях тройничного нерва при отсутствии клиники. Следует иметь в виду, что устойчивость вакцинированных свиней вовсе не означает отсутствие вирусоносительства и приживляемости дикого вируса - это обстоятельство является важнейшей эпизоотсшогической особенностью БА.

Клеточный иммунитет. При БА, помимо гуморального, имеет место и клеточный иммунитет. Факторы его развиваются на несколько дней раньше гуморальных, стимуляция лимфоцитов и появление ингибиции миграции макрофагов отмечены уже на 4-е сут. Вирус- специфический клеточный иммунитет наблюдается на 4-й день после заражения, а гуморальные АТ обнаруживаются только на 7-й день. Инактивированные вакцины в отличие от живых индуцируют слабый клеточный иммунитет. Положительную кожноаллергическую реакцию у вакцинированных животных обнаруживали в течение 3 мес при содержании в сыворотке крови АТ в титре 3-8 log2

Меры борьбы

Очень трудно искоренить инфекцию с помощью прививок вакцинными препаратами. Такие прививки затрудняют, но не предотвращают инфицирование поголовья и распространение вируса среди свиней. Однако сокращаются экономические потери. Ликвидация БА возможна лишь путем уничтожения серопозитивных животных, что в свою очередь исключает профилактические прививки традиционными живыми или инактивированными вакцинами, поскольку в этом случае серопозитивность у привитых и переболевших животных не дифференцируется (22). Однако создание новых нетрадиционных вакцин открывает новые возможности преодолеть трудности. Вакцины (живые и инактивированные) из штаммов, дефектных по gpl, имеют преимущества, поскольку позволяют серологически отличать вакцинированных и инфицированных животных (93,94).

Вопрос о ликвидации БА в крупных свиноводческих хозяйствах РФ приобрел для ветеринарной службы актуальное значение и в этом отношении немецкий опыт может явиться прецидеитом для подражания. Так, в частности, в земельном округе Оснабрюк с сентября 1989 г. 5000 свиноводческих хозяйств включились в программу ликвидации этой инфекции. Поголовье округа насчитывало 90 тыс. племенных свиноматок, 420 тыс. откормочных свиней и 225 тыс. поросят. Программа включала пункты вакцинации всех животных и вывоз из хозяйств серопозитивных племенных свиней. Успех программы обеспечивался регистрацией всех поросят в хозяйствах и созданием временного табло вакцинации с помощью компьютера. Вакцинировано 95% регистрированного поголовья, и число новых вспышек БА быстро сокращалось. Ликвидация болезни возможна лишь при ежегодной 100%-ной вакцинации поголовья свиней (47).

В Швеции описан успешный опыт искоренения БА в стаде по получению поросят- отъемышей путем использования gl-негативной инактивированной вакцины против БА в сочетании с ELISA, позволяющим осуществлять дифференциацию между вакцинированными и инфицированными животными при условии применения такой вакцины.

В последнее время 43 страны сообщили о регистрации Б A (FAO, WHO, OIE 1990).

Англия, Дания, ГДР сообщили об успехе программы оздоровления. Программа оздоровления в Англии начата в 1983 г. и финансирование её осуществлялось за счет удержания с владельцев скота 30 фунтов (около 0,55$) на убойную голову (26а, 72, 105, 106). Наблюдения в этих странах продолжаются и основываются на мониторинге племенных хряков. В стадах свиней штата Илинойс (США), квалифицированных как свободные от ВБА, выявлялись отдельные особи с низким титром АТ к вирусу “дикого” типа, причем клинически выраженных случаев заболевания ни у этих животных, ни у остальных в том же стаде не регистрировалось. В течение 2,5 лет в этом штате было выявлено 12 таких животных. Выделить вирус не удалось (100). Об активизации программ оздоровления в настоящее время сообщили 14 стран: Болгария, Куба, Чехия, Словакия, Ямайка, Япония, Мексика, Нидерланды, Норвегия, Румыния, США, Россия, Вьетнам и Югославия^ АО, WHO, OIE, 1990). Об активном планировании программ контроля Б А сообщили Германия, Франция и Венгрия.