<<
>>

8.1. Влияние гипоксии и СО2 - среды на образование АФК в митохондриях растений

Ранее нами было изучено влияние гипоксического стресса и СО2 - среды на содержание различных типов АФК и активность ферментов в тканевых гомогенатах растений гороха, сои и кукурузы.

В тоже время известно [60], что клеточные компартменты могут вносить вклад в процесс накопления активных форм кислорода в растениях в условиях различных стрессовых факторов, и их роль неоднозначна. Показано [209], что в дыхательной цепи митохондрий возможно неполное восстановление молекулярного кислорода с образованием различных типов АФК, избыточное накопление которых может привести к гибели клеток. В митохондриях продуцируется меньше АФК, по сравнению с хлоропластами и пероксисомами, но в темноте или в не зеленых частях растений данные органоиды являются одним из основных источников образования активных кислородных радикалов [209]. Нами показано, что образование АФК в тканях растений происходило даже в условиях кратковременной (3-24 ч) гипоксии. В связи с этим исследовали роль разных органоидов в процессах накопления активных форм кислорода в растениях гороха, сои и кукурузы при действии гипоксии и среды высоких концентраций диоксида углерода. Клеточные фракции митохондрий, хлоропластов и цитоплазмы выделяли из растений после нахождения их 3,6 и 24 часов в условиях гипоксии или СО2 - среды. Для доказательства чистоты выделенных клеточных фракций в предварительных опытах определяли маркерный фермент сукцинатдегидрогеназу для митохондрий, а содержание хлорофилла определяли для хлоропластов (таблица 6).

Распределение хлорофилла и активность сукцинатдегидрогеназы в

клеточных фракциях исследуемых растений
фракция цитоплазма хлоропласты митохондрии
горох
содержание пигментов, % 1,92 95 1,4
активность СДГ, % 10,45 0 87,5
соя
содержание пигментов, % 1,80 87 1,5
активность СДГ, % 12,0 0 82,0
кукуруза
содержание пигментов, % 3,8 90,2 1,1
активность СДГ, % 0 0 92

Как показали полученные нами результаты в митохондриальных фракциях, выделенных из клеток проростков гороха и сои, активность маркерного фермента СДГ во фракции митохондрий достигала 82-87 %, проростков кукурузы - до 92 % от общей активности.

При этом содержание хлорофилла составило менее 2 %, что свидетельствует о высокой чистоте фракции митохондрий. Для фракции хлоропластов гороха, сои и кукурузы содержание хлорофилла составляло 87-95 % от общего содержания в клетках. Активность сукцинатдегидрогеназы составила менее 1 %, что свидетельствует о высокой чистоте фракции хлоропластов. Во фракции цитоплазмы растений активность сукцинатдегидрогеназы составила менее 12 %, а содержание хлорофилла до 4 %, что свидетельствует о достаточно высокой степени чистоты.

Как известно, наиболее опасным типом АФК для клеточных структур является именно супероксидный анион-радикал. В отличие от молекулярного кислорода, который свободно перемещается через клеточные мембраны, супероксид не способен преодолевать гидрофобный барьер [5]. Образовавшийся супероксид при этом еще является источником других активных форм кислорода и способен индуцировать дальнейшие процессы

перекисного окисления липидов [60, 130]. Как показано в таблице 7, в митохондриях растений гороха в первые часы действия газовых сред опыта содержание супероксидного анион-радикала было практически на уровне контрольных растений, но затем оно начинало возрастать. К 6 часам произошло увеличение содержания супероксидного анион-радикала на 20 % в СО2 - среде и на 54 % в условиях гипоксии у проростков гороха. Затем на протяжении последующих часов действия гипоксического стресса в митохондриях происходило снижение содержания супероксида. К 24 часам в митохондриях растений при гипоксии содержание данной АФК оставалось по-прежнему выше контроля, а при действии СО2 - среды падало ниже уровня аэрируемых растений.

Влияние гипоксии и СО2 - среды на продукцию супероксидного анион-радикала в митохондриях растений гороха, сои и

кукурузы

вариант горох соя кукуруза
мкМоль О2- мг-1 белка % от контроля мкМоль О2- мг-1 белка % от контроля мкМоль О2- мг-1 белка % от контроля
3 часа
воздух 9,9 ± 1,2 100 3,0 ± 0,02 100 4,4 ± 0,32 100
гипоксия 10,7 ± 1,3 108 1,8 ± 0,17 60 3,5 ± 0,13 80
СО2 - среда 8,1 ± 0,9 82 2,4 ± 0,12 80 3,8 ± 0,29 86
6 часов
воздух 3,5 ± 0,15 100 3,6 ± 0,25 100 9,0 ± 0,75 100
гипоксия 5,4 ± 0,21 154 4,1 ± 0,21 113 7,4 ± 0,43 82
СО2 - среда 4,2 ± 0,30 120 3,5 ± 0,30 97 6,8 ± 0,50 76
24 часа
воздух 3,8 ± 0,29 100 5,1 ± 0,39 100 6,4 ± 0,30 100
гипоксия 5,3 ± 0,40 139 5,6 ± 0,30 109 8,3 ± 0,45 130
СО2 - среда 3,1 ± 0,15 82 5,8 ± 0,55 114 7,7 ± 0,65 121

В тоже время у более устойчивых растений сои в митохондриях в начале опыта вообще не наблюдалось накопления супероксида, и его содержание было ниже уровня аэрируемых растений. К 6 часам опыта содержание супероксидного анион-радикала в митохондриях увеличивалось до контрольных значений.

К концу опыта у растений как при действии гипоксии, так и в СО2 - среде происходило незначительное (на 9-14 %) накопления супероксидного анион-радикала в митохондриях. В митохондриях среднеустойчивых растений кукурузы после 3-6 часов действия гипоксии и среды высоких концентраций диоксида углерода уровень супероксидного анион-радикала был ниже контрольных значений. Только к концу опыта наблюдалось его накопление у растений в условиях гипоксии на 30 %, а в СО2 - среде на 21 % по отношению к митохондриям контрольных растений, так же как и у растений сои.

Таким образом, полученные нами данные показали, что в митохондриях в условиях гипоксии могут активно продуцироваться отдельные виды АФК, в частности супероксидный анион-радикал. При этом у менее устойчивых проростков гороха это отмечалось уже в первые часы действия гипоксического стресса, а у более устойчивых проростков сои и кукурузы происходило только в более поздние сроки экспозиции (через 24 часа). Нужно отметить, что в условиях СО2 - среды также и в те же периоды активно продуцировался супероксидный анион-радикал в митохондриях исследуемых растений.

Предполагают [225], что в митохондриях растений возможно образование и пероксида водорода в условиях гипоксического стресса. В связи с этим нами было проведено определение содержания данного типа АФК в митохондриях данных растений при действии кратковременной до суток гипоксии и СО2 - среды. Как видно из данных, представленных на рис. 12, в митохондриях растений гороха накопление пероксида водорода отмечалось уже в первые 3 часа действия гипоксии и достигало 134 %.

При действии СО2 - среды увеличение содержания почти вдвое данной формы АФК происходило через 6 часов опыта. К концу опыта содержание пероксида водорода в митохондриях растений, находящихся в условиях гипоксии, сохранялось на том же уровне. При действии СО2 - среды содержание пероксида водорода в митохондриях наоборот снижалось.

В митохондриях более устойчивых растений сои содержание пероксида к 6 часам при действии на растения газовых сред резко возрастала (почти в 1,8-2,2 раза). Однако к концу опыта содержание пероксида падало до уровня аэрируемых растений в СО2 - среде, а в условиях гипоксии оставалось выше контрольных растений.

В митохондриях среднеустойчивых растений кукурузы наблюдали небольшое (до 30-37 %) накопление пероксида водорода, но только в первые 3 часа действия газовых сред. Затем его содержание резко падало и становилось более чем в 2 раза ниже по отношению к митохондриям аэрируемых растений.

Проведенные исследования впервые показали возможность накопления значительного количества супероксидного анион-радикала и пероксида водорода в митохондриях растений в условиях кратковременной гипоксии. При этом уровень накопления разных типов АФК в митохондриях зависел как от сроков действия, так и от степени устойчивости растений к дефициту кислорода. При этом действие СО2 - среды на растения гороха и сои (бобовые растения) было на отдельных этапах более эффективным в отношении образования АФК в митохондриях этих растений, чем условия обычной гипоксии. Особенности действия среды высоких концентраций диоксида углерода на жирнокислотный состав мембран митохондрий растений кукурузы ранее уже были показаны [39, 47].

<< | >>
Источник: Бердникова Ольга Сергеевна. ВОЗДЕЙСТВИЕ ГИПОКСИИ И СРЕДЫ ВЫСОКИХ КОНЦЕНТРАЦИЙ СО2 НА ОБРАЗОВАНИЕ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В КЛЕТКАХ РАЗЛИЧНЫХ ПО УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ. 2016

Еще по теме 8.1. Влияние гипоксии и СО2 - среды на образование АФК в митохондриях растений:

  1. Бердникова Ольга Сергеевна. ВОЗДЕЙСТВИЕ ГИПОКСИИ И СРЕДЫ ВЫСОКИХ КОНЦЕНТРАЦИЙ СО2 НА ОБРАЗОВАНИЕ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В КЛЕТКАХ РАЗЛИЧНЫХ ПО УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ, 2016
  2. ВЛИЯНИЕ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА УСЛОВИЯ ПИТАНИЯ РАСТЕНИЙ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ УДОБРЕНИЙ
  3. Влияние условий среды
  4. ПИЩА КАК ФАКТОР СРЕДЫ И ЕЕ ВЛИЯНИЕ НА НАСЕКОМЫХ
  5. 10.3. ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА ПОВЕДЕНИЕ И АДАПТАЦИЮ ЖИВОТНЫХ
  6. Глава 8 ВЛИЯНИЕ НА НАСЕКОМЫХ СВЕТА И ДРУГИХ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ СРЕДЫ
  7. РОЛЬ КАЛИЯ В УСВОЕНИИ АММИАКА И В ОБРАЗОВАНИИ АКТИВНЫХ ФОРМ УГЛЕВОДОВ В РАСТЕНИИ [21]
  8. 8-5** Формирование митохондрий
  9. РЕАКЦИИ РАСТЕНИЙ НА ДЕЙСТВИЕ СРЕДЫ
  10. Влияние высотных факторов и принципы формирования искусственной газовой среды в кабине
  11. 6-5* Была ли митохондрия симбионтом?
  12. РАСТЕНИЯ-ИНДИКАТОРЫ ЗАГРЯЗНЕННОСТИ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
  13. эмиссия со2
  14. О влиянии свойств почв на стойкость растений.
  15. Кислотные дожди и их влияние на растения
  16. ВЛИЯНИЕ ЗАСОЛЕНИЯ НА РАСТЕНИЯ
  17. ВЛИЯНИЕ ХОЛОДА НА РАСТЕНИЯ И ПРИСПОСОБЛЕНИЯ К НЕМУ
  18. Образование льда Вертикальная циркуляция и образование льда в пресной воде
  19. ОСОБЕННОСТИ ВЛИЯНИЯ БИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ. ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ СВЯЗИ НАСЕКОМЫХ С РАСТЕНИЯМИ
  20. МНОГОЛЕТНИЕ ЦИКЛИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В СРЕДЕ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ