ВИРУСНАЯ ДИАРЕЯ-БОЛЕЗНЬ СЛИЗИСТЫХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Вирусная диарея - болезнь слизитых оболочек (ВД-БС) - инфекционная контагиозная болезнь КРС, преимущественно молодых животных, характеризующаяся эрозивно-' язвенным воспалением слизистых оболочек пищеварительного тракта, ринитом, увеличением лимфоузлов, высокой лихорадкой, общим угнетением, лейкопенией, постоянной или перемежающейся диареей, эрозивным и язвенным стоматитом с обильным слюноотделением, появлением слизисто-гнойных истечений из носовой полости.

На основании различий в клинических проявлениях вирусную диарею и болезнь слизистых оболочек КРС первоначально рассматривали как разные болезни. Позднее на основании анализа патологических изменений, особенностей эпизоотологии и клинических проявлений эти 2 болезни стали обозначать под названием вирусная диарея - болезнь слизистых оболочек КРС (119,132). Поскольку установлена идентичность возбудителей этих болезней, то их считают одной инфекцией с различными клиническими проявлениями, преимущественным развитием респираторного или диарейного синдрома, в связи с чем болезнь чаще стали называть вирусная диарея КРС (2а).

Болезнь зарегистрирована во всех странах мира. В некоторых штатах США обнаруживается до 70-90% серопозитивных животных (16,18).

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Симптомы болезни, тяжесть переболевания, широта распространения и процент летальности зависят от вирулентности вируса, чувствительности животных и наличия неблагоприятных факторов. В естественных условиях болеют телята 5-6-мес возраста. Среди взрослых коров до 90% животных могут иметь специфические АТ, однако клинически болезнь не проявляется. Особенно типично она протекает в откормочных хозяйствах среди молодняка КРС. В Австралии ВД- БС поражает овец. Различают острое, подострое, хроническое и латентное течения болезни. При остром течении симптомы появляются внезапно и выражаются лихорадкой (39,5- 42,4°С) в течение 12-60 ч, умеренной или сильной депрессией, тахикардией, учащением дыхания и потерей аппетита, появлением множества эрозий и язв на слизистых оболочках ротовой полости и почти всего пищеварительного тракта (Рис. 135). С подъемом температуры регистрируют лейкопению. Особенностью острой формы ВД-БС является тромбоцитопения 1ТЗЗ, 144). У коров может развиваться и генитальная форма в результате контаминирования спермой. Эта форма у коров может клинически и не проявляется, однако имеются данные о том, что ВД-БС может быть связана с воспалением яичников у яловых телок (5).

У больных животных наблюдается истощение, обезвоживание и ацидоз. У лакгирую- щих коров снижается продуктивность. При осмотре ротовой полости у больных животных можно обнаружить эрозии на губах, краях десен, языка, комиссуры рта и задней части твердого нёба. Поражения могут сливаться, формируя большие зоны некроза и отторгаться в ротовую полость. Эрозии могут развиваться на носовом зеркальце, ноздрях и в носовой полости, а также вызывать сходные поражения вульвы и сосков вымени. Гиперсаливация является результатом поражения ротовой полости, которые встречаются в среднем у 75-80% больных животных. Часто наблюдается слизисто-гнойное истечение из носа, иногда слезотечение и отек роговицы. Отмечают также хромоту, затрудняющую движение, связанную с эрозиями и некрозом кожи межкопытной щели, ламинит и воспаление венчика.

На ранних стадиях заболевания отмечают сильную лейкопению. Развивается лимфопе- ния без сдвига влево и тромбопения; секундарные инфекции обычны. Смерть может произойти в острой фазе болезни, но чаще через 3-10 дн после проявления клинических признаков. На 7-9-й день появляется диарея и продолжается 1-4 нед. Испражнения водянистые, темные, содержат пузырьки зловонных газов, часто сгустки слизи и крови. В затяжных случаях в области шеи, плеч, колен, промежности и седалищных бугров кожа сморщивается, становится жесткой и покрывается перхотью. На препуции, основании мошонки и вымени появляются эрозии и засохшие корочки экссудата. Иногда выпадают волосы. Больные животные сильно худеют.

У пораженных коров отмечают выраженное снижение молочной продуктивности, аборты, гибель 6-8% телят от гнойной или фибринозной пневмонии, а у более старших (от 3 нед до 5 мес) - гибель от диареи с поражением кишечника. Телята, персистентно инфицированные вирусом диареи, после инфекции in uteri предрасположены к инфекции другими микроорганизмами, имеющимися в стаде, что приводит к развитию у них пневмонии (137а, 147). Чаще всего абортируют коровы, зараженные в ранний период стельности. С увеличением срока стельности острота инфекции у плода снижается. Болезнь продолжается от 4 дн до 2 нед и почти всегда заканчивается летально. У новорожденных телят наблюдается мозжечковая гипоплазия, проявляющаяся затрудненным вставанием и выраженной атаксией. У телят с гипомиелогенезом наблюдается тремор мышц сразу после рождения. Врожденные дефекты глаз могут привести к слепоте различной степени. При офтальмологическом исследовании легко выявляется катаракта. Недоразвитие скелетномышечного аппарата может привести к задержке роста плода (80). Это проявляется рождением слабых, мелких телят, которые часто гибнут уже в первые дни жизни. Телята, рожденные персистентно инфицированными коровами, имеют низкую жизнеспособность, подвержены ранним болезням и обычно погибают. Болезнь может проявляться респираторным и энтеритным синдромами (34).

На поздних стадиях стельности (после начального формирования иммунокомпетентности) инфекция редко вызывает врожденные пороки. Телята могут родиться нормальными и иметь ВНА к вирусу, однако они всегда будут внутриутробно инфицированными носителями вируса диареи (ВД). Новорожденные иммунокомпетентные телята могут заражаться от матерей при рождении. В таком случае часто развивается тяжелая форма энтерита, которая

сопровождается высоким процентом летальности (129). От больных коров-матерей часто рождаются телята с признаками ВД-БС. У них отмечают некрозы в легких, коже, мозге или поражения в ротовой полости, лихорадку, лейкопению, поражения в носовой полости. Падеж при дегидратации наступает в период от 18 до 96 ч.

Подострое течение характеризуется внезапностью, подъемом температуры тела на 1- 2°С, учащенным сердцебиением и дыханием, снижением или полной потерей аппетита. У некоторых больных поражаются слизистые оболочки ротовой полости, появляются истечения из носа, кашель и кратковременная (12-24 ч) диарея. Иногда болезнь протекает атипично и сопровождается гиперемией, цианизом слизистых оболочек и атонией преджелудков.

Абортивное течение инфекции, проявляющееся невысокой кратковременной лихорадкой, незначительным ринитом, иногда диареей, чаще наблюдают у молодняка старшего возраста и коров, в тех стадах, где регистрируют хроническое течение болезни; болезнь длится 3-4 дн, больные животные выздоравливают. Хроническое течение ВД-БС чаще наступает после острой вспышки болезни. Характерны длительная диарея и кахексия. Часто инфекция протекает субклинически (стертая форма), иногда сопровождается абортами, поносами и появлением слабого потомства. При латентном течении болезнь протекает бессимптомно и переболевание определяют по наличию специфических АТ. Последние часто находят у клинически здорового КРС неблагополучных хозяйств.

Превалирующее течение болезни - острое, одно из наиболее редких течений - персистентная инфекция (1 случай на 100 или 1000 животных). Она развивается у телят, рожденных от персистентно инфицированных коров при заражении эмбриона в течение первых 4 мес стельности нецитопатогенным вирусом. Хроническое течение ВД-БС - следствие персистентной инфекции. Идентификация персистентно инфицированных животных основана на выделении вируса и обнаружении ВНА. Однако не у всех персистентно инфицированных животных образуются ВНА к не цитопатогенному вирусу. Bolin S.R. (45) привел схемы развития различных клинических течений болезни, вызываемых цитопатогенными и нецитопа- тогенными вирусами, и прямых методов диагностики (45).

Характерные патологоанатомические изменения обнаруживают на слизистых оболочках ЖКТ и верхних дыхательных путей. Эрозии и язвы находят на слизистой оболочке губ, щек, десен, на боковых поверхностях языка, на нёбе, у основания гортани. Аналогичные поражения обнаруживают в рубце и сычуге. В тонком кишечнике отмечаются изменения, характерные для катарального, фибринозно-некротического или геморрагического энтерита. У отдельных больных животных на 21-й день после заражения отмечают поражения глаз. Врожденная курчавость волосяного покрова телят является симптомом персистентной инфекции у коров (100). Полагают, что вирус может индуцировать у телят диабет (31,141).

Клиническое проявление ВД-БС в определенной степени зависит и от биотипа заражающего штамма. Так, цитопатогенный шт. TVM-2 вызывает у телят явные клинические признаки, характерные для острого течения болезни. Не цитопатогенный шт. Нью Йорк-1 вообще не индуцирует каких-либо клинических признаков болезни. Однако инфицирование любым из 2-х биотипов телят, иммуносупрессированных дексаметазоном приводит к летальному исходу. Смешанная инфекция, вызываемая обоими биотопами, не вызывает какой-либо серьезной болезни, что, возможно, исключает потенциальную иммуносупресси- рующую активность самого вируса (57).

В США сообщалось о геморрагическом синдроме у КРС с острой инфекцией, вызванной нецитопатогенными штаммами ВД КРС. Отмечалась тяжелая тромбоцитопения. Аналогичный синдром идентифицирован в нескольких стадах Южной Бельгии (48).

Патогенез. Вирус легко преодолевает плацентарный барьер и вызывает у плода развитие патологических изменений, приводящих к морфологическим и функциональным нарушениям (церебральная гипоплазия, микроофтальмия, катаракта). Если заражение плода

произошло в течение первой половины беременности, развивается иммунологическая толерантность и теленок родится персистентно инфицированным нецитопатогенным штаммом вируса. Если такие животные суперинфицируются цитопатогенным штаммом вируса, развивается тяжелая болезнь с летальным исходом. Если суперинфекция вызвана гетерогенным цитопатогенным штаммом вируса, то развивается хроническая болезнь (92). У большинства телят, родившихся от больных матерей, еще до первой дачи молозива имеются ВНА, что свидетельствует о внутриутробном инфицировании.

В патогенезе болезни характерным моментом является блокирование иммунореактивности организма вследствие поражения иммунокомпетентных клеток, доказательством чему служит значительное снижение титров противовирусных АТ и, в частности противогриппозных, после заражения телят ВД. При ВД-БС КРС подавляются нормальные защитные механизмы, предположительно гуморальные факторы или фагоцитарная функция, что приводит к неингибируемому циркулированию бактерий в крови. Последствием клинически I легкой диареи КРС является иммуносупрессия, повышается восприимчивость животных к ^другим инфекциям. Персистентная форма ВД-БС наблюдается у телят, родившихся от коров, зараженных не цитопатогенным вирусом. Клинически такие телята представляются здоровыми, хотя у них наблюдается постоянная виремия. Полагают, что ВД путем подавления иммунных реакций способствует диссеминации вируса ИРТ в организме телят. Показана возможность передачи инфекции через инфицированную вирусом сперму и способность трансплацентарной передачи. Вирионы и обусловленные вирусом ультраструктурные изменения выявляются, главным образом, в Т-лимфоцитах, моноцитах и лишь в единичных случаях в В-клетках. В патогенезе ВД-БС еще многое не ясно. Например, в сыворотке крови реконвалесцентов до 9-18 мес выявляются специфические АТ, далее животное становится серонегативным, но не выздоравливает. У таких хронически больных животных удается выделить вирус из крови и лимфоузлов. Не ясна причина, обусловливающая серонегативное состояние больного хроника. Трансплантация лимфоцитов от такого животного здоровому сопровождается заболеванием и гибелью от обезвоживания в течение 6 мес.

У плодов после заражения отдельных коров (150-дн стельности) на 17-й день находили воспаление мягких оболочек мозга, некроз клеток наружного зародышевого листка, очаги геморрагий и умеренный отек. На 42-й день поражались весь мозжечок, кожа (ненормальный волосяной покров) и бронхиолы. Нередки случаи мумификации плода. Установлена следующая зависимость действия вируса на зараженные эмбрионы, при заражении эмбрионов до 125-дн возраста наблюдали латентную персистентную инфекцию (не цитопатогенным штаммом) или с проявлением симптомов болезни (цитопатогенным штаммом). Инфицирование приводило к аборту стельных коров или рождению нежизнеспособного потомства (со скрытой инфекцией). Гибель телят при остром течении болезни наступала в течение 5-7 сут, при хроническом - от 10 сут до нескольких месяцев; у телят развивались эрозии и язвы на слизистой оболочке носа.

Помимо мононуклеарных клеток, АГ ВД-БС обнаруживают в лимфоидной ткани плодов КРС. Инфекция плодов ведет к патологическим изменениям лимфоидной ткани, гипоплазии тимуса. Гистопатологические изменения обнаружены в мозжечке, коже и слизистых оболочках. С 5-мес срока стельности титр специфических АТ у плода нарастает. При заражении плода в 7-мес возрасте вирус, как правило, в организме не находят, так как титр АТ достаточно высок. С возрастом плода нарастает способность его отвечать плазмоцнтарной реакцией в ответ на заражение. Интересно, что 1&М у плодов от зараженных стельных коров появляется примерно через 2 нед после инокуляции вируса коровам и через 7 дн он сменялся 1^С. Предполагают, что раннее появление 1? в сыворотках эмбрионов - результат АГ активации поликлональных В-клеток эмбриона. С эпизоотической точки зрения вертикальная передача ВД играет важную роль в поддержании и сохранении инфекции. При наличии на

ферме вирусоносителей другие телята активно продуцируют АТ после исчезновения материнских АТ, не проявляя симптомов болезни.

Предложена и экспериментально доказана гипотеза, согласно которой для появления клинически выраженной болезни требуется персистентная инфекция животных нецитопато- генным и последующая инфекция цитопатогенным ВД. Животные становятся персистентно инфицированными нецитопатогенным вирусом после внутриматочной инфекции плода до развития иммунокомпетентности. Когда в постнатальный период такие телята суперинфи- цируются цитопатогенным ВД, это приводит к появлению клинически выраженной болезни, обычно заканчивающейся летально (51, 37, 131, 138). Не цитопатогенные штаммы вызывают латентную персистентную инфекцию КРС без образования АТ, что предрасполагает к развитию тяжелого клинически выраженного заболевания после заражения цитопатогенным штаммом ВД (44). Цитопатогенные штаммы вируса попадают в организм извне или появляются в результате мутации эндогенного нецитопатического штамма.

Болезнь слизистых оболочек с тяжелой диареей, выделениями из носа, язвами на слизистой оболочке рта иногда заканчивается летально. Смерть обычно наступает через 1-3 нед (32, 73). Основная причина снижения репродуктивной способности коров при ВД-БС - это нарушение оплодотворения. ВД оказывает иммуносупрессивное действие, связанное с подавлением защитной функции и разрушением инфицированных лимфоцитов и лейкоцитов (клеток-мишеней) (54а, 137а, 67), что в полевых условиях резко снижает устойчивость телят и повышает тяжесть неонатальных диарей и респираторных заболеваний (32, 98).

Распространение повреждений при БС связано со способностью прямого некротического воздействия вируса на эпителиальные клетки ЖКТ. Вирус также воздействует на эндотелиальные клетки сосудов, особенно в кишечнике и лимфоидной тканн (33). Наиболее часто у вирусоносителей возникает хроническое течение болезни. Патогенез хронической болезни слизистых не определен, но он во многом сходен с таковым при остром течении болезни. Как и при остром течении ВД-БС может быть вызвана как нецитопатогенным, так и цитопатогенным штаммами вируса (110). Предполагают, что различия в антигенности суперинфицирующего цитопатогенного вируса дают различную клиническую картину у персистентно инфицированных животных (46, 49, 50). В одном случае это может проявляться острым течением, когда суперинфицированный вирус обладает близкой гомологией с персистентно инфицирующим нецитопатогенным штаммом, в другом - латентным течением без клинических симптомов. Между 2-мя этими крайностями может встречаться течение болезни, описываемое как хроническое. Хроническое течение характеризуется отсутствием аппетита, потерей массы тела, прогрессирующим истощением и задержкой развития животного. Диарея может быть постоянной и перемежающейся. Может наблюдаться хроническая пневмония, часто появляются носовые и глазные истечения. Могут развиваться аллопеции (обычно в области шеи) и гиперкератозы. Хронические эрозии часто обнаруживают в ротовой полости, на коже промежности, препуции, вульве, вокруг рудиментарных пальцев, межпальцевой щели и пяточной части копытца. В этих случаях обычны секундарные бактериальные инфекции. Животные с хронической ВД-БС могут прожить до 18 мес и, в конце концов, погибают от тяжелого истощения или секундарной инфекции (33).

Влияние вируса на плод. Плоды КРС очень чувствительны к заражению ВД из-за своей агамма-глобулинемии, иммунологической незрелости и наличия во многих органах недифференцированных клеток. Цитопатогенные штаммы вируса ПБО повреждают плаценту и плод. При заражении коров шт. NADL и овец шт. ВД-3 наблюдается ранняя смерть эмбрионов, аборты, мергворождения, недоразвитость плодов, малая масса родившихся телят, наличие у них вирусной персистенции и иммунологической толерантности. На 80-90-й день стельности изменения выявлялись в легких плода и коже, при инфицировании на 140-150-й день возникала дисплазия сетчатки и гипоплазия мозжечка, вызванная непосредственным повреждением вирусом этих органов. При заражении суягных овец шт. ВД-3 ягнята рождались слабыми, с курчавой шерстью. У них наблюдался тремор, персистентная виремия, иммунологическая толерантность и гипомиелинизация (121,125).

Конгенитальные аномалии. В 1986-97 гг. в Японии были зарегистрированы 25% кон- генитальных аномалий на ферме молочного скота голштино-фризской породы. Часть коров абортировали, у 43% родились телята с нарушением ЦНС. Инфицирование происходило между 90-150 дн беременности. Инфицирование после 150 дн беременности не отражалось на (140) иммунотолерантности плода к ВД-БС. Такие телята оставались на всю жизнь персистентно инфицированными. Иммунотолерантность и персистентная инфекция встречаются естественно и могут быть воспроизведены экспериментально. Точная стадия развития плода, когда инфекция может вызвать иммунстолерантность, неизвестна, однако приблизительно она возникает в сроки 100-125-дн стельности. Кроме того, показано, что иммунотолерантность и персистенция обусловлены только не цитопатогенными штаммами ВД (39, 40, 41, 43, 44,110).

Инфицирование коров в период 50-100-дн стельности может привести к смерти плода с последующей его мумификацией, абортом или мертворождением (27, 128). Освобождение от плода может произойти в промежутке от нескольких недель до месяца после заражения, однако в стационарно неблагополучных стадах процент таких случаев низок. В стадах, где преобладают коровы, не имеющие АТ к ВД КРС, этот процент может достигать 30 (25, 72). Инфицирование плода примерно 100-150-дн стельности может привести к появлению врожденных дефектов у новорожденных телят (73, 103, 105). В этот период вирус поражает стволовые клетки развивающихся систем.

Связь биотипов вируса с клиническим проявлением заболевания. Воздействие и взаимодействие 2-х биотипов вируса, описанных ранее, в последние 6 лет стало предметом пристального изучения и вызывает не только научный, но и практический интерес к расшифровке патогенеза ВД-БС КРС. При остром течении инфекции первично вирус проникает через слизистую носа или рта, затем распространяется по лимфоидной системе организма. Некоторые полевые штаммы хорошо адаптируются к росту на слизистой оболочке носовой полости (94). Эта способность быстрой репродукции в слизистых оболочках рта и носа может объяснить возникновение слюнотечения, неглубоких эрозий, язв, а также катарального воспаления тонкого кишечника, что характеризует острую инфекцию. Дальнейшие осложнения острой инфекции встречаются, когда к ВД-БС КРС присоединяются другие патогены. Многократно отмечали смешанные инфекции с возбудителем ИРТ (1), респираторно- синцитальной инфекцией (139а). ВД-БС в ассоциации с ротавирусной и коронавирусной (145), или сальмонеллезной (140) инфекциями проявляется в виде тяжелой формы болезни с энтеритным синдромом.

Некоторые эпителиальные ткани поддерживают репликацию ВД. Его АГ был обнаружен в кератоцитах языка, кожи и губ (36) и это может быть связано с образованием эрозии в ротовой полости, на носовом зеркальце, что характерно для хронического течения болезни. Необходимость антигенной гомологии между персистирующим и суперинфицирующим биотипом вируса стала решающей для развития клиничски выраженной формы ВД-БС и индуцирования персистенции и иммунотолерантности (50). Выявлено, что VII биотип имеет тропизм к мезентериальным лимфоузлам (60) и что при последующем развитии поражений этот биотип вируса быстро переходит в пейеровы бляшки (52), вызывая их поражение и диарею. Патогенез хронического течения болезни объяснить трудно. В подавляющем большинстве случаев персистентно инфицированные животные не проявляют хроническую форму болезни и этот синдром экспериментально не воспроизводится. Если иммунотолерант- ные животные суперинфицируются VII изолятом, который только частично гетерологичен и на его детерминанты могут быть выработаны АТ, то такой вирус из организма полностью не элиминируется.

В патогенезе БС первоначально не цитопатогенный вирус заражает плод и приводит к развитию персистентной виремии у телят. БС у таких телят может возникнуть при суперинфекции “гомологичным” цитопатогенным вирусом, образовавшимся в результате мутации.

По мнению Becker J.C., БС - это спорадическая форма ВД, возникающая обычно у животных в возрасте от 6 мес до 2-х лет. Заболевает менее 5% животных, но летальность достигает 100% (33). Хроническая болезнь может развиваться у телят при суперинфекции гетерогенным цитопатогенным биотипом вируса с персистентной виремией (53). У персистентно инфицированных быков ВД постоянно контаминирует сперму, которая служит источником заражения чувствительных к вирусу телок, но инфекция не всегда передается потомству вертикально (123).

В патогенезе ВД-БС первыми поражаются нейтрофилы, затем инфицируются макрофаги, отмечается 2-кратное уменьшение числа Т-супрессоров с сохранением числа Т-хелперов без изменений. Увеличивается содержание общего белка и IgG, а снижение числа В- лимфоцитов и моноцитов бывает переходящим и нормализуется к 30-му дню (3). Поскольку вирус реплицируется во всех главных субпопуляциях лимфоцитов и в других клетках, результатом могут быть лейкопения, что является продолжением инфекции; повреждаются В- клетки и Т-клеточные субпопуляции. В- и Т- клетки повреждаются вследствие воздействия ВД и их способность противостоять другим инфекциям утрачивается (93, 94).

Согласно концепции патогенеза ВД-БС (131) клинически выраженное заболевание возникает только у животных, которые инфицируются вирусом на ранней стадии беременности и рождаются с персистирующей вирусной инфекцией и специфической иммунотолерантностью. Врожденные дефекты могут развиваться, когда инфекция плода происходит на промежуточных сроках стельности. Плод может быть инфицирован внутриматочно на поздних строках стельности, при этом инфекция не персистирует и у плода вырабатываются АТ. По- стнатальная инфекция проявляется в виде субклинических заболеваний с нормальным иммунным ответом (90,131).