Актиномицеты

  Методы выявления и количественного учета акти- номицетов. Выделение актиномицетов и их количественный учет проводят методом посева почвенной суспензии на плотные среды — крахмало-аммиачную, крахмало-казеиновую среду, среду Чапека, среду с хитином и др.

В качестве селектирующих агентов при выделении актиномицетов из почвы используют ингибиторы, подавляющие рост других микроорганизмов — антибиотики (пенициллин — 1 мг/л, стрептомицин — 25 мг/л, полимиксин — 5 мг/л, нистатин — 50 мг/л, цикло- гексимид — 50 мг/л, пимарицин — 50 мг/л), фенол и другие химические вещества.
Выделение актиномицетов методом посева на плотные среды дает возможность в той или иной степени выявить набор видов, содержащихся в той или иной почве, но не дает представления о том, находятся ли актиномицеты в почве в состоянии спор или активно растущего вегетативного мицелия. Для выявления в почве мицелия актиномицетов существует метод прогревания почвенной суспензии при 55— 70°, основанный на том, что гифы большинства актиномицетов гибнут при этой температуре, а споры остаются в жизнеспособном состоянии. Вегетативный мицелий актиномицетов можно также наблюдать при помещении в почву стекол обрастания по Холодному в модификации Рыбалкиной и Кононенко (см. с. 227) и капилляров Перфильева и Габе (см. с. 228).
Методы прямого микроскопического учета (метод Виноградского и метод подсчета в люминесцентном микроскопе), применяемые для учета бактерий, могут быть использованы и для учета актиномицетов.
Методы исследования почвенных актиномицетов. Культуральные признаки актиномицетов описывают на плотных питательных средах — синтетических и белковых. При описании колоний обычно отмечают цвет воздушного и субстратного мицелия, наличие растворимого пигмента, выделяемого в среду; наличие складчатости колоний (концентрическая или радиальная); поверхность колоний (мучнистая, бархатистая, порошковидная, пушистая).

Морфологические свойства актиномицетов — строение колоний и мицелия, его ветвление, строение и расположение спороносцев — можно изучать, просматривая колонии актиномицетов на плотной питательной среде в чашках Петри при малом увеличении микроскопа. Для более детальных исследований получают рост актиномицетов на предметных или покровных стеклах. В агаре на чашках Петри стерильным скальпелем вырезают 1—2 желобка шириной в 1 см во всю глубину агара. Края желобка с помощью петли засевают культурой актиномицета. На засеянные участки желобков накладывают покровные или предметные стекла. Чашки инкубируют обычным способом.
При этом актиномицет развивается на поверхности стекла, граничащей со средой. Стекла с развивающейся на них культурой снимают с агара и исследуют прижизненно или после фиксации и окраски.
Для знакомства с формой спор актиномицетов делают препарат- отпечаток. Чистое покровное стекло накладывают на газон актиноми-

Рис. 42. Спороносцы актиномицетов « сканирующем электронном микроскопе


цета и слегка прижимают к поверхности мицелия. Затем снимают и опускают его в каплю воды на предметном стекле вниз той стороной, на которой имеется налет актиномицет а. Характер поверхности спор выявляют в электронном микроскопе (рис. 42).
Для фиксации и окраски мицелия актиномицетов применяют в основном те же методы, что и для бактерий. Для изучения деталей
строения спороносцев и спор можно применять фиксацию жаром и окрашивание 0,02%-ным водным раствором кристаллического фиолетового или метиленового синего. 

Еще по теме Актиномицеты:

1. БАКТЕРИИ И АКТИНОМИЦЕТЫ
2. МИЦЕЛИАЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ (АКТИНОМИЦЕТЫ)
3. Отрицательное влияние
4. ВАЖНЕЙШИЕ ИТОГИ РАБОТЫ КАФЕДРЫ БИОЛОГИИ почв Н. А. Красильников
5. ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ БАКТЕРИИС ВЫСОКИМ СОДЕРЖАНИЕМ Г+Ц
6. Бактерии
7. РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ ЗАНЯТИЯ
8. Грамположительные бактерии
9. НАВОЗ ЗАРАЖАЕТ ПОЧВУ И ЕЕ ОБИТАТЕЛЕЙ
10. Цитофаги
11. Микробиологическая диагностика и биологическая активность почв
12. />РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ ЗАНЯТИЯ
13. Принцип дублирования
14. МЕЖОРГАНИЗМЕННЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ