Иммунологический анализ в тканях растений

Метод иммунных отпечатков (Tissue Blot Immunoassay — TBI) позволяет с большой точностью локализовать антигены фитопатогенных организмов (главным образом, вирусов и в меньшей степени грибов, бактерий и фитоплазм) в растительных тканях.

Тест представляет собой перенос антигенов исследуемого образца с поверхности среза растительной ткани на поверхность нитроцеллюлозной мембраны путем блоттинга с последующим выявлением иммобилизованных на мембране антигенов антителами, несущими ферментную метку. Такой перенос возможен благодаря высокой сорбционной емкости нитроцеллюлозы по отношению к макромолекулам и вирусным частицам. Процесс по сути аналогичен переносу белков Вестерн блоттингом после электрофореза с геля на мембрану, но сама процедура более проста. Для того чтобы получить отпечаток растительной ткани на нитроцеллюлозе, свежий срез ткани своей поверхностью на доли секунды слегка прижимают к мембране. Более сильный контакт является нежелательным, поскольку высокое или продолжительное давление может повредить поверхность среза и исказить отпечаток. TBI может быть прямым или непрямым, в зависимости от использования для локализации возбудителя вирус-специфичных или видоспецифичных антитель- ных конъюгатов (или протеина А).
В отличие от EL1SA, пероксидазные конъюгаты являются, как правило, неподходящими для TBI, т. к. во многих растительных тканях присутствуют активные пероксидазы. Щелочная фосфатаза — более подходящий фермент при использовании данного метода. Следующее условие состоит в том, что конечный окрашенный продукт ферментативной реакции должен быть нерастворимым и оставаться на мембране, в том месте, где произошло иммунохимическое взаимодействие. Для того чтобы TBI был применим в тканях, содержащих большие количества эндогенных пигментов, мешающих локализации антигенов, используют хемилюминисцентные субстраты и рентгеновскую пленку. 

Еще по теме Иммунологический анализ в тканях растений:

1. Анализ растений
2.   ПРИБОРЫ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ  
3. Определение витаминов, общие свойства, классификация,подготовка растений к анализу
4. Е. П. Дурынина, В. С. Егоров. Агрохимический анализ почв,растений, удобрений, 1998
5. 19.3. Простейшие, обитающие в тканях
6. 19.3.2. Простейшие, обитающие в тканях и передающиеся трансмиссивно
7.   Определение витамина в биологических жидкостях и тканях.  
8. 2.2.1.1. Сравнительная оценка методов выявления грибов рода Malassezia на покровных тканях животных
9. Глава 6 МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕЛЬМИНТИКОВ В ОРГАНАХ И ТКАНЯХ ЖИВОТНЫХ
10.   Определение токоферолов в тканях и сыворотке крови методом колоночной хроматографии. 
11.   Определение свинца в органах и тканях животных посредством ААС (по В. В. Устенко, 1980). Метод утвержден отделением ветеринарии ВАСХНИЛ, 1980.  
12. Анализ ситуаций
13. Анализ по С.П. Мартынову
14. 14.3.6. Корреляционный анализ растительности
15. Функциональный анализ роста
16. Анализ моделей и сценариев