Элективные среды

В первую очередь нас интересовали грибы и бактерии, участвующие в разложении клетчатки и лигнина.

Целлюлоза из еловой древесины и лигнин были получены из Ленинградской лесотехнической академии. Эти материалы не представляют из себя абсолютно чистых препаратов, но для первоначального выделения микроорганизмов мы и не считали рациональным применять тщательно очищенные продукты, а стремились использовать материалы, обогащённые интересующим нас веществом. Основанием к этому служат работы Ваксмана и других исследователей, показавшие, что на чистых препаратах лигнина микроорганизмы большей частью не развиваются, между тем в природных условиях процесс разрушения лигни- нв. наблюдается. Дальнейшие эксперименты с выделенными культурами велись уже на чистых препаратах.

К перечисленным источникам углерода (фильтровальная бумага, целлюлоза из еловой древесины и лигнин) добавлялись стандартные растворы питательных солей.

В качестве оптимального для роста целлюлозоразлагающих бактерий был взят раствор № 2, содержащий азот в форме KNO3. Для грибов применялись растворы № 1 и № 3 кислой и нейтральной реакции с содержанием азота в форме сернокислого аммония и пептона.

Для обнаружения целлюлозоразлагающих микроорганизмов мы пользовались двумя методами культур: в колбах Эрленмейера по Ван- Итерсону (накопительные культуры) и на гелевых пластинках по Виноградскому.

В последнем случае кружки фильтровальной бумаги или целлюлозы, покрывающие пластинки с гелем, пропитывались соответствующими стандартными растворами, концентрация солей в этих растворах равнялась 5-кратному их содержанию в основных растворах.

На чашку диаметром 10 см давали 2 см3 концентрированного раствора. Засев производили эмульсией и кусочками. Выделение чистых культур производили на гелевых пластинках с фильтровальной бумагой.

Среды из лигнина готовили по образцу сред из древесины. К стандартным растворам № 1, 2, 3 добавляли 1% порошка лигнина и 2% агар-агара. Засев производили в чашках Петри эмульсией и кусками.

Для выявления ряда физиологических групп бактерий, принимающих участие в круговороте азота, применяли общепринятые в микробиологии элективные среды. Для выявления аммонифицирующих микроорганизмов посев производили на пептонную воду с количественным учётом аммонифицирующих бактерий методом разведения. Присутствие денитрифицирующих микроорганизмов определялось посевом на среду Гильтая с количественным учетом методом разведения и учётом интенсивности образования NO2 и N.

Наличие нитрификаторов определялось посевом на гелевые пластинки по способу Виноградского; для выявления анаэробных азотфик- сирующих бактерий производился посев на среду Омелянского с количественным учетом методом разведений.