ИССЛЕДОВАНИЕ МОКРОТЫ  

Мокроту извлекают из трахеи с помощью специальных носотрахеальных зондов (Габрилавичуса, Корикова и др.) или из гортани после рефлекторно вызванного кашля.

Физические свойства. Слизистая мокрота слегка беловатая, вязкая, характерна для острого бронхита; серозная — жидкая, бесцветная, пенистая, наблюдается при гиперемии и отеке легких; слизисто-гнойная — желтого или зеленоватого цвета, вязкая, образуется при хронической бронхопневмонии; серозно-фибринозная — характерна для крупозной пневмонии; гнойная — появляется при гнойно-катаральной пневмонии, прорыве абсцесса, зеленовато-желтого оттенка. Красный цвет мокроты обусловлен наличием в ней крови.

Запах у мокроты чаще отсутствует. Зловонный запах появляется при гангрене, абсцессе легких, аспирационной бронхопневмонии. В мокроте можно обнаружить кусочки омертвевшей легочной ткани при гангрене легких, частицы опухолей, сгустки фибрина, которые присутствуют при дифтерийном ларингите, крупозной пневмонии.

Микроскопия. Микроскопическое исследование мокроты проводят в нативных и окрашенных препаратах. Материал для исследования выбирают из разных мест и переносят металлической иглой на предметное стекло, покрывают покровным стеклом так, чтобы мокрота не вытекала за его края. Препарат должен быть тонким, элементы в нем должны располагаться однослойно. Просмотр вначале проводят под малым увеличением (объектив х 8, окуляр х Ю), при котором обнаруживают скопление клеток, нити эластических волокон, элементы новообразований, затем под большим увеличением (объектив X 40, окуляр X 10).

Исследование под большим увеличением позволяет обнаружить в значительном количестве лейкоциты (воспалительные, нагнои- тельные процессы), эритроциты в виде желтоватых дисков (легочное кровотечение, застой в малом круге кровообращения), микроорганизмы.

Цилиндрический мерцательный эпителий в небольшом количестве присутствует в каждом образце мокроты, в большом — при трахеите, бронхите, бронхопневмонии.

В эпителиальных клетках специальными методами исследования находят вирусные тельца-включения — хламидии (хламидиоз- ная бронхопневмония) или микоплазмы (микоплазменная пневмония).

Альвеолярные макрофаги — крупные клетки, в 2—3 раза больше лейкоцитов, в большом количестве появляются в мокроте при воспалении бронхов и легких, застое крови в малом круге кровообращения, пороках сердца.

Макрофаги можно выявить реакцией образования берлинской лазури. Кусочек мокроты помещают на предметное стекло, прибавляют 1—2 капли 2%-ного раствора кислоты хлористоводородной и 1—2 капли 5%-ного раствора желтой кровяной соли. Перемешивают стеклянной палочкой и покрывают покровным стеклом. Излишек реактива удаляют фильтровальной бумагой. Через несколько минут зерна гемосидерина, находящиеся в макрофагах, окрашиваются в синий или сине-зеленый цвет.

В мокроте при распаде легочной ткани обнаруживают эластические волокна. Они имеют вид тонких двухконтурных изогнутых волоконец. Их обнаруживают не в каждой капле мокроты, поэтому прибегают к концентрации:

метод 1: к нескольким миллилитрам мокроты прибавляют такое же количество 10%-ного раствора натрия гидроксида и нагревают до растворения слизи. При этом растворяются слизь, форменные элементы крови, но остаются эластические волокна. Затем к жидкости добавляют 3—5 капель 1%-ного спиртового раствора эозина, центрифугируют, а осадок исследуют под микроскопом. Эластические волокна сохраняют свою структуру и выделяются ярко-красным цветом. Однако посторонние волокна и нити тоже могут окраситься эозином и мешать распознаванию эластических волокон;

метод 2: наиболее специфической пробой является окраска эластических волокон резорцин-фуксином Вейгерта. Готовят раствор красителя: 0,5 г основного фуксина и 1 г резорцина растворяют в 50 мл дистиллированной воды, нагревают до кипения и постепенно приливают раствор из 2 г железа хлорида в 10 мл воды. Смесь кипятят 5 мин, осторожно встряхивая, после охлаждения фильтруют. Фильтр с осадком переносят в колбу, заливают 70 мл 96%-ного этилового спирта и осторожно нагревают. Осадок краски при этом должен раствориться. После удаления фильтра к охлажденному раствору добавляют 1 мл 25%-ной кислоты хлористоводородной. Хранят краситель несколько месяцев.

Ход определения.

В нативных неокрашенных препаратах мокроты можно обнаружить мицелии, характерные для грибов различных видов, поселяющихся в органах дыхания (кандидоз, аспергиллез и др.), а также актиномицеты. Грибы из рода Кандида развиваются в органах дыхания при длительном лечении животных антибиотиками. При поражении легких грибами из рода Кандида в нативном препарате обнаруживают почкующиеся дрожжеподобные клетки и ветвистый мицелий, на котором споры расположены мутовками. Друзы акти- номицетов макроскопически имеют вид мелких желтоватых зернышек, содержащихся в гнойной части мокроты. Микроскопически они представляют собой сплетения тонкого мицелия, концы которого заканчиваются колбообразными вздутиями. При окраске препарата по Граму нити мицелия грамположительны, колбообразные вздутия — грамотрицательны.

Окраска по Граму. Готовят реактивы: карболовый раствор ген- цианового фиолетового: 1 г генцианового фиолетового растворяют в 10 мл 96%-ного этилового спирта, раствор выливают в 100 мл

1. 2%-ного раствора карболовой кислоты, взбалтывают; раствор Люголя — 1 г йода, 2 г калия йодида и 300 мл дистиллированной воды; йод и калия йодид растворяют сначала в 5—8 мл воды, а затем приливают оставшуюся воду; 96%-ный этиловый спирт; 10%-ный раствор карболового фуксина: 10 г карболового фуксина и 90 мл дистиллированной воды.

На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги и смачивают ее раствором генцианового фиолетового. Красят 1,5—2 мин. Бумагу сбрасывают и заливают раствором Люголя на 2 мин, препарат прополаскивают в спирту до серого цвета. Промывают водой и окрашивают 10%-ным раствором карболового фуксина 10—15 с. После этого препарат опять промывают водой, высушивают и исследуют под микроскопом.

При окрашивании раздавленной друзы актиномицетов мицелий приобретает фиолетовую, а колбочки розовую окраску. Акти- номицеты обнаруживают в мокроте при актиномикозе легких.

Бактериоскопия окрашенных препаратов. Для бактериоскопи- ческого исследования мазки готовят, растирая комочек мокроты между двумя предметными стеклами. Высушенный мазок фиксируют, медленно проводя его 3 раза через слабое пламя газовой горелки, и окрашивают чаще по Граму. В окрашенных по Граму препаратах обнаруживают грамположительные пневмококки, стрептококки, грамотрицательные диплобациллы, E. coli и др. Грамполо- жительная и грамотрицательная микрофлора — постоянный обитатель респираторных органов, она становится патогенной при определенных условиях. При воспалительных процессах в бронхах и легких ее количество резко возрастает. Специальными бактериологическими методами определяют вирулентность микрофлоры мокроты, ее устойчивость к антимикробным препаратам.

Источники: 28, 31.