КИЛХЕМ-ВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ КРЫС

Клинические признаки и патологоанатомические изменения.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Вирус RV впервые выделил и описал в 1959 г. Килхем. Он обнаружен в опухолевой ткани крыс. Первоначально хомячковые остеолитические вирусы были выделены из трансплантируемых опухолей эмбрионов и плацент человека. В 1962 г. Меркалова и Жданов описали вирус 59-КВ, выделенный из соединительной ткани крыс, обработанных канцерогеном в предсаркоматозной стадии, таксономия которого точно не установлена.

Морфология и химический состав. Диаметр очищенных вирионов 18 нм, они имеют 32 капсомера, константа седиментации 122S. Плавучая плотность 1,31 г/см3- 1,43 г/см3. Вирионы содержат 25,6% ДНК. Нуклеотидный состав ДНК: А - 26,7%; Т - 30,8; Г - 20 и Ц - 22,5%. Мол.м. ее, определенная центрифугированием в градиенте сахарозы 2-10 6Д, константа седиментации 16,1S.

ДНК (длина молекулы которой 1,505+0,206 мкм), Предполагается, что часть родительской 1-спиральной ДНК переходит в 2-спиральную, которая, как и 1-ая, имеет линейную структуру. По физико-химическим свойствам вирус RV сходен с мелким вирусом мышей и бактериофагом ФХ 174. В присутствии экзогенной ДНК он способен вызывать полимеризацию дезоксирибонуклеозидгрифосфатов, но не рибонуклеозидтрифосфатов.

Устойчивость. Очищенный вирус сохраняет инфекционность в условиях хранения при - 4°С или при -60°С, не снижая титра. Термостабилен и выдерживает прогревание при 80°С в течение 2 ч, чувствителен к эфиру, хлороформу и другим жирорастворителям. Облученный вирус не подвергается реактивации в клетках хозяина.

Антигенная структура. Показано различие в антигенной структуре шт. H-RV и RE- RV: в состав H-RV входит 4 компонента, а в состав RE-RV - только 3. Обнаружен АГ вируса и динамика его накопления в культуре кожно-мышечной ткани эмбриона крыс.

Антигенная активность. Поскольку вирус RV у крыс вызывает латентную инфекцию, то в сыворотках некоторых здоровых лабораторных и диких крыс есть анти-ГА и ВНА (выявляемые в культуре ткани). Шт. RV-13 выявляется в РТГА- наиболее чувствительной реакции для обнаружения АТ к вирусу. В сыворотках крыс линий Wistar и August обнаружены анти-ГА в значительных титрах, что свидетельствует о широком распространении вируса Килхема в бывшем СССР.

Антигенная вариабельность и родство. Крысиный вирус Килхема по серологическим свойствам отличается от вирусов полиомы, энцефаломиокардита и других крысиных вирусов. Последние, выделенные из разных источников, в иммунологическом отношении родственны, но в серологическом отношении неидентичны. Описаны 3 серотипа вируса Килхема (Н-1 и НТ, RV и Н-3 и ЕВ), которые различаются между собой в перекрестной РТГ А.

ГА свойства. Вирус RV обладает Г А активностью. Г А его ассоциированы с инфекционной частицей. Все 5 шт. Н-вируса дают РГА с эритроцитами морской свинки и хомячка, в то время как RV агглютинирует предпочтительно эритроциты морской свинки и человека.

Локализация вируса, вирусоносительство и вирусовыделение. Если у экспериментально заражённых и погибших крысят инфекционный вирус и ГА удаётся обнаружить в мозге, лёгких, печени, почках, селезёнке, крови и моче, то крысята и матери, конгактирущие с заражёнными животными, не заболевают, но инфицируются - у них появляются АТ.

Экспериментальная инфекция. Крысиный вирус Килхема при внутримозговом, внутривенном и подкожном введении вызывает гибель новорождённых крысят на 4-14-й день после заражения. При подкожном введении беременным крысам вирус RV проникает в эмбрионы, инфекция развивается у родившихся крысят и проявляется поражением зубов. Прн заражении крыс непосредственно в плод за 5-6 дн до родов ткани эмбриона содержали вирус независимо от титра специфических АТ у матери.

Вирус RV не вызывает клинически выраженной болезни у взрослых хомячков, мышей и швейцарских альбиносов. Однако новорождённые хомячки до 24-ч возраста особенно чувствительны к малым дозам вируса. Большими дозами можно инфицировать хомячков даже в 4-6-дн возрасте, а у хомячков-сосунков развивается быстро протекающая инфекция, обусловливающая гибель. В меньших дозах вирус RV вызывает карликовость животных и так называемый монголоидный вид. На основании внешних изменений у инфицированных хомяков вирус характеризуется как остеолитический.

При изучении лёгочных заболеваний у мышей обнаружены изменения в эндотелии, характерные для вируса Килхема. Серологически инфекцию подтвердить не удалось, но при длительном пассировании (слепые пассажи) была доказана скрытая инфекция вирусом RV. RV является латентным агентом и передаётся вертикально от матери потомству. Культивирование. Вирус Килхема культивируется в первичной культуре - эмбриональной ткани крыс (ПКЭК), эмбриональной ткани золотистых сирийских хомячков и в культуре мышиных фибробластов. ЦПИ в ПКЭК появляются через 24 ч после заражения. ГА появляется через 16 ч после заражения и достигает максимального титра через 26 ч. Шт. ЮАЗ культивируется в организме новорождённых хомячков в субкультуре клеток кожномышечной ткани эмбрионов крыс.

Особенности внутриклеточной репродукции. Вирус ЛУ реплицируется лишь в тех клетках, в которых синтезируется клеточная ДНК в момент заражения. У вируса Килхема ДНК-зависимая ДНК-полимераза входит в состав вириона в качестве субструктурного компонента и осуществляет репликацию 1-спиральной ДНК. Последняя синтезируется по принципу комплементарности с образованием промежуточной репликативной формы.

Вирус ЛУ вызывает изменения в ядрах, там появляются множественные базофильные включения округлой или овальной формы, которые не имеют тенденции к слиянию. Феномен маргинации хроматина в пораженных ядрах слабо выражен. Вирусный АГ в поражённых клетках выявляется с помощью ИФ через 24-48 ч после заражения в виде многочисленных очагов свечения, соответствующих фельгенположительным зонам. В более поздней стадии (через 4 дн) светящиеся гранулы появляются также и в цитоплазме. ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции. В естественных условиях, видимо, происходит горизонтальная и вертикальная передача вируса IIV. Уровень АТ к вирусу ЯУ у матери определяет восприимчивость или резистентность крысят. От матери вирус передаётся потомству, при введении его беременным крысам за 1-5 дн до родов крысята погибают через 7-9 дн после рождения. Передача вируса происходит транспланцентарно, но не через молоко, так как крысята, рождённые нормальной самкой и вскармливаемые заражённой самкой, не заболевают. Крысята, рождённые заражённой самкой, и вскармливаемые нормальной самкой погибают от инфекции.

Спектр патогенности в естественных условиях. Крысиные вирусы не вызывают заболевания у крыс, от которых они выделены, но вызывают «монголоидность» новорожденных хомячков с летальным исходом.

ДИАГНОСТИКА

Вирус Килхема, по-видимому, широко распространён, так как у значительного числа здоровых крыс, как лабораторных (линия Бргафхе), так и диких (вид Найигв погуе^сив, КаИигв гаИигэ), обнаружены ГА к вирусу. Трудность выделения вируса Килхема объясняется низкой концентрацией его в организме, существованием вирусного ингибитора и, возможно, существованием вируса в виде комплекса вирус-антитело, который разрушается при пассировании вируссодержащей ткани в культуре клеток.