Определение дезоксиниваленола в зерне с применением обращен- но-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.  

A. H. Леоновым, C. H. Ланиным, В. В. Петренко (1995) и рекомендован отделением ветеринарной медицины РАСХН.

Дезоксиниваленол (вомитоксин, 3,7,15-триокси-12,13-эпоксит- рихотец-9-ен-8-он) относится к классу высокотоксичных микотоксинов с ЛД50 для лабораторных животных 40—50 мг/кг.

Принцип. Метод основан на экстракции микотоксина из размолотого зерна или муки смесью ацетонитрила и воды, колоночной очистке экстракта на смеси активированного угля и цеолита с последующим определением содержания микотоксина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектированием при длине волны 224 нм.

Реактивы: ацетонитрил (ч.);

вода дистиллированная;

спирт изопропиловый (ч.);

тетрагидрофуран (ч.);

калия гидроксид гранулированный;

дезоксиниваленол, аналитический стандарт.

Оборудование: хроматограф жидкостный микроколоноч- ный «Милихром» или аналогичный; мельница МРП-1; делитель БИС-1; испаритель ротационный ИР-1; насос водоструйный; баня песочная с терморегулятором; фильтры бумажные с синей лентой; уголь активированный марки «АГН», техн.; колонка хроматографическая 62 х 2 мм с фазой Cie «Nucleceil Сjg»; колонка для очистки экстрактов [воронка типа ВФ-2, на дно которой закладывается 5—6 кусочков фильтровальной бумаги с толщиной слоя 0,2—0,3 см, затем засыпается слой адсорбента (смесь активированного угля и цеолита 1:1) 1 г и алюминия оксид 4 г]; прибор для перегонки растворителей; колбы стеклянные разные; цилиндры мерные.

Ход определения. 25 г размолотого зерна (муки) помещают в колбу на 250 мл и заливают 125 мл раствора для экстракции (ацетонитрил-вода 5:1 по объему).

Для количественного определения содержания дезоксинивале- нола в образце предварительно строят калибровочный график на стандартном растворе микотоксина. Для этого 20 мкг дезоксинива- ленола растворяют в 1 мл подвижной фазы (тетрагидрофуран-вода 1:1 по объему) и последовательно вводят в хроматограф в объеме

1. 2,...,10 мкл, что соответствует количественному содержанию микотоксина 20, 40,...,200 нг. Количество дезоксиниваленола в исследуемом образце определяют по высотам пиков стандартных растворов и анализируемых проб.

Расчет содержания микотоксина в мг/кг исследуемого образца проводят по формулам, приведенным для ГЖХ.