Использование промежуточных векторов
Суть данного подхода заключается в том, что вначале клонируется Т-ДНК в Е. coli с использованием плазмиды pBR322. Затем, фрагменты ДНК, содержащие целевой ген, встраивают в определенные места Т-ДНК, предварительно выделенной плазмиды и, полученные таким образом химерные плазмиды повторно клонируют в клетках кишечной палочки (рис.
Клонированные плазмиды вносят в клетки A. tumefaciens, имеющие плазмиду pTi дикого типа. В результате гомологичной рекомбинации происходит встраивание химерной Т-ДНК из промежуточного вектора в интактную pTi-плазмиду дикого типа. Полученные клоны агробактерии, несущие рекомбинантную pTi-плазмиду с целевым геном используют в опытах по трансформации растений.
Еще по теме Использование промежуточных векторов:
- ОТКЛОНЕНИЕ ЕСТЕСТВЕННОЙ ОРИЕНТАЦИИ ЯЧЕЕК ОТ ВЕКТОРА ГРАВИТАЦИИ
- ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ
- 20.1.1.3. Сосальщики с двумя промежуточными хозяевами
- Озимые промежуточные культуры
- Функции промежуточного мозга и ретикулярной формации
- Применение навоза в сочетании с возделыванием промежуточных и кормовых культур
- ГЛАВНОЕ И ПРОМЕЖУТОЧНОЕ ПОЛЬЗОВАНИЕВ ОСУШЕННЫХ ЛЕСАХ КАРЕЛИИ
- 20.1.1.2. Сосальщики с одним промежуточным хозяином, обитающие в кровеносных сосудах
- ПРИМЕРНЫЕ ПЕРЕЧНИ ВИДОВ ДЛЯ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ПОСАДОК В СУБТРОПИЧЕСКИХ САДАХ
- ТРАДИЦИОННЫЕ СПОСОБЫ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ КУЛЬТУР В ЗАСУШЛИВЫХ МУССОННЫХ РЕГИОНАХ
- РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
- ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ