БИОТЕСТИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ НА КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА Нгуен Тхи Минь Кхань, Машенцева Н.Г., Колотвина С.В. Московский государственный университет пищевых производств, Москва, Россия. natali-mng@yandex.ru
BIOASSAY OF BIOLOGICAL OBJECTS ON CELL LINES OF ANIMAL AND HUMAN Nguyen Thi Mink Khanh, Mashentceva N.G., Kolotvina S.V. Все большее распространение в различных областях современных фундаментальных и прикладных исследований находят методы клеточной биологии.
В настоящее время можно культивировать клетки практически всех тканей и органов человека и животных. Основное направление использования клеточных культур в пищевой промышленности - тестирование и изучение механизма действия различных функциональных добавок. Биотестирование сможет дать более полную и подробную информацию о безопасности биологически активных добавок и продуктов функционального назначения. Нами предлагается метод для определения адгезивных свойств бактерий с помощью линию клеток CaCo-2 (эпителеподобные клетки аденокарценомы ободочной кишки человека) в монослое. Преимущества прилагаемого метода заключаются в том, что метод использует непосредственно человеческую клетку СаСо-2 для определения адгезивных свойств бактерий, которые являются одним из важных свойств пробиотических штаммов, применяемых в пищевой промышленности. Метод позволяет изучить исследуемые свойства непосредственно на эпителиальных клетках человека, что позволяет смоделировать условия желудочно-кишечного тракта человека. При данном способе клетки используются в виде монослоя, это позволяет определить количество адгезивных бактерий с большей точностью. Также нами предложен метод биотестирования функциональных пищевых ингредиентов, заключающийся в определении их влияния на состояние клеточных линий. В качестве клеточных тест-систем выбраны клеточные линии: ДКЛЧ 900/14, ФЛЭЧ-104, фибробласты легкого эмбриона человека; Vero, линия клеток почки африканской зеленой мартышки; HEp-2, эпидермоидная карцинома гортани человека; А 549, карцинома легкого человека; RD, рабдомиосаркома человека; Т 98G, глиобластома человека (ООО «БиолоТ», ФГБУ науки Институт цитологии РАН, г. Санкт-Петербург). Сформировавшийся монослой клеток обрабатывают исследуемыми образцами или их спиртовыми экстрактами в течение часа. Затем через 24 ч после смены питательной среды подсчитывают количество живых и мертвых клеток. При выявлении онкостатического эффекта у исследуемых образцов проводят дополнительный тест - анализ цитостатичности in vitro с помощью МТТ-теста. Результаты, полученные на клеточных культурах, нельзя экстраполировать непосредственно на весь организм. Однако не вызывает сомнения, что если то или иное вещество оказывает онкостатическое действие в нескольких линиях культивируемых клеток, следует ожидать благоприятного эффекта и при его действии на организм человека в целом. Более того, результаты тестов оказываются более воспроизводимыми, когда они проводятся in vitro. Работа выполнена при поддержке Гранта президента РФ № МД 3302.2012.4 ВЛИЯНИЕ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА СОСТАВ ЛИПИДОВ МЕМБРАН ГАЛОФИТНОГО РАСТЕНИЯ SUAEDA SALSA Нестеров В.Н., Розенцвет О.А., Богданова Е.С.
Институт экологии Волжского бассейна РАН, Тольятти, Россия. nesvikl@mail.ru INFLUENCE OF ABIOTIC FACTORS ON STRUCTURE OF LIPIDS OF MEMBRANES OF HALOPHYTE PLANTS SUAEDA SALSA Nesterov V.N., Rozentsvet O.A., Bogdanova E.S. Согласно современным оценкам, одна пятнадцатая часть земной суши, включая территории, используемые сельским хозяйством, занята засоленными почвами. Подавляющее большинство видов гликофитов выдерживают лишь слабое засоление (0.2 0. 4 % от сухой массы почвы) и только некоторые из них (овес, пшеница и др.) - среднее (0.4-0.7 %). В отличие от гликофитов, галофиты способны осуществлять жизненный цикл на сильнозасоленных почвах и солончаках. Высокое содержание солей в почве не только не подавляет, но даже стимулирует их рост. В целом, механизмы солеустойчивости могут быть разделены на две основные группы: нейтрализующие неблагоприятное действие солей и регулирующие транспорт ионов из среды в клетку. Ко второй группе можно отнести механизмы, связанные с защитными функциями мембран и их липидной основой. Цель данной работы - исследовать влияние абиотических факторов среды на состав липидов Suaeda salsa (L.) Pall. из семейства Chenopodiaceae. Растения отбирали в устьевых участках шести соленых рек, расположенных на территории Волгоградской обл. и питающих оз. Эльтон. В период вегетации температура воздуха варьировала в июне в пределах 24-30°С, в июле - 29-36°С, сентябре - 13-22°С. Кислотность почвенного раствора за весь период наблюдений варьировала в интервале 6.8 7.8, а влажность почвы - в июне в пределах 10-29 %, в июле - 11-24 %, в сентябре - 1541 % от сырой массы почвы. Уровень минерализации почвенного раствора составлял: в июне 0.2-1.0, в июле - 0.4-2.4, в сентябре 0.2-3.1 г/л. Состав липидов оценивали по содержанию суммарных липидов, соотношению основных групп липидов и индивидуальных классов липидов внутри каждой группы. Достоверно было установлено, что на состав липидов оказывали влияние уровень минерализации и влажность почвы. Корреляционный анализ показал взаимосвязь данных факторов среды не только с общим уровнем липидов, но и с такими биохимическими характеристиками мембран как отношения фосфолипиды/стерины и фосфатидилхолин/фосфатидилэтаноламин, по которым можно судить об изменении вязкости липидной фракции мембран растения. Например, с увеличением солености снижалось значение отношения фосфолипиды/стерины (r = -0.58 при p < 0.01), а с увеличением влажности снижалось значение отношения фосфатидилхолин/ фосфатидилэтаноламин ( r = -0.69 при p < 0.01), но увеличивалось содержание суммарных липидов (r = 0.64 при p < 0.01).
Еще по теме БИОТЕСТИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ НА КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА Нгуен Тхи Минь Кхань, Машенцева Н.Г., Колотвина С.В. Московский государственный университет пищевых производств, Москва, Россия. natali-mng@yandex.ru: