Комплексообразующая способность триглицеридпептидовPseudomonas

Образование межмолекулярных комплексов с углеводами и их стехиометрический состав определяли следующими способами:

- методом Бента-Френча [Бек, Надьпал, 1989] по спектрам вычитания растворов метаболитов с углеводами при помощи спектроскопии в УФ-области при длинах волн 260-265 нм, соответствующих я —gt; я* электронным переходам карбонильных групп метаболитов, на спектрофотометре Specord М 40. Спектры вычитаний снимались для водных растворов, содержащих постоянное количество метаболита (0,001 моль/дм3) и возрастающее количество углевода, соответствующее мольным отношениям метаболит : углевод = 1:1, 1 : 10, 1 : 30, 1 : 50. В канале сравнения находился раствор метаболита без углевода. Тангенсы

углов наклона графиков, построенных в логарифмических координатах:

где AD - разность оптической плотности раствора метаболит : углевод;

Суглевод ~ концентрация углевода в растворе метаболит : углевод; соответствуют мольным отношениям в комплексе метаболит: углевод;

- методом поляриметрии по изменению угла вращения в зависимости от мольного соотношения метаболит : углевод на поляриметре СМ-2 (Россия). Углы вращения снимали для водных растворов метаболитов (0,01 моль/дм3) и углевода (0,01 моль/дм3) в различных соотношениях. Отклонение угла вращения смеси этих растворов от монотонного изменения угла вращения в зависимости от мольного соотношения компонентов в смеси и указывает на образование комплекса метаболит : углевод и его стехиометрию.

Вольтамперограммы растворов, содержащих 0,01 моль/дм3 ионов Zn+2 и переменное в интервале 0-0,01 моль/дм3 количество метаболитов изучаемых штаммов псевдомонад, регистрировали с использованием современной разновидности полярографии - постояннотоковой вольтамперометрии.

Установлено, что в присутствии молекул метаболитов потенциал пика восстановления ионов цинка смещается в сторону более отрицательных потенциалов, а высота пика восстановления при этом уменьшается. Смещение пика восстановления и уменьшение его величины постоянно в интервале концентраций метаболитов от 0,001 до 0,01 моль/дм3. Эффект смещения пика

Рис. 15. Стехиометрия молекулярных комплексов метаболитов Pseudomonas с мальтозой методом поляриметрии

восстановления в сторону более отрицательных потенциалов и уменьшение его величины указывают на то, что ионы цинка в водных растворах образуют комплексные соединения с метаболитами псевдомонад сложного стехиометрического состава, содержащие несколько ионов цинка на одну молекулу метаболита.

В УФ-спектрах всех трех метаболитов имеется максимум поглощения, лежащий на длинах волн 260-265 нм и соответствующий я —» я* электронным переходам карбонильной группы метаболита. Методом Бента-Френча по спектрам вычитания растворов метаболитов с мальтозой установлено, что стехиометрия молекулярных комплексов соответствует составу метаболит : мальтоза = 1:1. Стехиометрия молекулярных комплексов метаболитов с мальтозой была также подтверждена методом поляримет- рии. Установлено, что смесь растворов метаболита и углевода имеет монотонно изменяющийся угол вращения [а] в зависимости от их мольного соотношения. Но при их соотношении 1 : 1 обнаруживается отклонение от монотонности с ярко выраженным минимумом угла вращения (рис. 15).

В природных условиях корневая система растений выделяет в ризосферу различные вещества, в том числе и углеводы. Борьба за источник питания между бактериями р. Pseudomonas и фитопатогенами может характеризоваться продукцией во внешнюю среду метаболитов, которые, связывая субстрат, ограничивают его доступность для других микроорганизмов. Поэтому хелатообразующая способность по отношению к углеводам, по всей вероятности, обусловливает дополнительное ингибирующее действие на прорастание спор фитопатогенных грибов в средах, содержащих в качестве источника углерода различные сахара.