Препараты на ровных предметных стеклах


Обычны в экологических работах. В них используют застывающие фиксирующие смеси. Одна из самых распространенных смесей -жидкость Фора и ее модификации.
Рецепт жидкости Фора: 200 г хлоралгидрата, 30 г гуммиарабика, 50 мл дистиллированной воды и 20 мл глицерина. Сухие порошки тщательно смешивают в темной банке, затем добавляют жидкости и оставляют на несколько часов часов до полного растворения. Если компоненты слежались (комки), то растворение идет медленнее. Процесс можно ускорить, поместив смесь в термостат при 40-50 °С. При необходимости готовую жидкость фильтруют. Для работы жидкость Фора отливают в небольшой темный пузырек с узким горлышком, вставляют пипетку.
Требуются: стекла предметные (толщина не более 1 мм), стекла покровные. Небольшой размер стекол (18 х 18 мм) удобнее, т.к. экономит фиксирующую жидкость и усилия по просмотру препарата при дальнейшей работе.
Очистка стекол. Поставляемые с завода предметные стекла требуют очистки перед изготовлением препарата. Обычно протирают каждое стекло с двух сторон хлопчатобумажной или бумажной салфеткой непосредственно перед изготовлением препарата. Более рационально очистить сразу партию стекол: стекла моют жесткой губкой в теплой воде с моющим средством, промывают прохладной водой и сушат. Для избежания образования солевых пятен после сушки стекла на последнем этапе при помощи пинцета можно окунуть в дистиллированную воду. Для лучшей сушки стекла ставят полувертикально на бумажную салфетку — вода стечет, не оставив следа. Покровные стекла также нужно очистить. Поставляемые известными фирмами покровные стекла можно сразу использовать для изготовления препарата. При острой нехватке стекол размывают старые ненужные препараты.
Всех микроартропод из пробы переносят в каплю жидкости Фора и накрывают покровным стеклом. Если экземпляров слишком много, то используют несколько капель и покровных стекол, помещенных желательно на одном предметном. Одно предметное стекло вмещает 2-3 покровных с содержимым проб из одного биотопа.
Не забудь! Подпиши препарат, скопировав этикетку из флакона
Для подписи препарата используют тонкий фломастер, гелевую ручку или перо с тушью. Можно распечатать этикетку на компьютере и приклеить на стекло (подходит клей ПВА), либо использовать самоклеющуюся бумагу.
Этапы приготовления препарата: Экземпляры перенести в подготовленную капельку жидкости Фора на предметном стекле. Если жидкость Фора слишком густая, ее можно разбавить дистиллированной водой (другую не использовать!);
Важно: размер капельки определяется величиной особей, крупные особи требуют более толстый слой жидкости
Примечания: очень темные экземпляры коллембол лучше предварительно просветлить для последующего определения. До перемещения в жидкость Фора их выдерживают в слабом растворе (5- 10%) гидроксида калия (КОП) до приобретения ими красного, а затем прозрачно-розового цвета (не передержать!). Затем отмывают, выдерживая несколько минут в слабом растворе глицерина, и, наконец, переносят в жидкость Фора. Клещи станут более прозрачными после медленного нагревания в молочной кислоте, свойства которой можно усилить добавлением такого же количества фенола (получается лактофенол) и прогревом в термостате при температуре +40... +50 °С. очень грязные экземпляры нужно очистить, помещая в вязкие среды (например, в глицерин). определение ряда видов коллембол, гамазовых клещей и прочих требует предварительного вычленения отдельных частей тела. Это в первую очередь ротовой аппарат, его отделяют с помощью острых игл и помещают в препарате рядом с основным телом или под отдельное стекло. чтобы не раздавить выпуклых микроартропод, например, крупных панцирных клещей, в жидкость Фора кладут кусочки покровного стекла или другие «подпорки». при большом экологическом материале из малоизученных районов (возможны новые виды) имеет смысл помещать экземпляры, требующие детального таксономического изучения, под отдельное покровное стекло.
Мелкие особи лучше заливать отдельно от более крупных. Переместить животных с края этой капли к середине (иначе они могут быть выдавлены за край покровного стекла), по возможности распределяя их равномерно и следя за тем, чтобы они не налегали друг на друга, чтобы схожие особи клещей располагались и на вентральной и на дорсальной стороне тела. Накрыть покровным стеклом: медленно (иначе может остаться пузырек). Жидкость должна слегка выходить за пределы покровного стекла - потом она втянется. Если ее будет мало, в препарат втянется воздух. По мере подсыхания жидкости с образованием пустот под покровным стеклом, ее можно добавлять. В первые 3-4 дня полезен ежедневный контроль свежих препаратов Написать или приклеить этикетку. Высушить препарат в течение 2-4 недель при повышенной температуре (+50... +55 °С), при более высокой температуре по краям покровного стекла нередко образуются пузыри воздуха, а закипание жидкости Фора вообще испортит препарат). Определение можно проводить уже через 3-5 дней сушки. Оконтурить покровное стекло для многолетнего длительного хранения. При недлительном хранении (менее 1-3 лет), которое обычно при серийных экологических исследованиях, оконтуривание не обязательно, т.к. после застывания края жидкости Фора на некоторое время предотвращают попадание воздуха внутрь.
Преимущества препаратов с жидкостью Фора: можно заливать много экземпляров под одно покровное стекло (важно для экологов), чаще можно использовать иммерсию при микроско- пировании (препарат более тонкий), лучше видна нижняя сторона тел микроартропод, препараты в целом сохраняются дольше, край покровного стекла можно не оконтуривать, простые предметные стекла: не надо делать лунок, быстрее изготавливать препарат, труднее испортить (не давятся при нагрузке сверху).
Типичные ошибки при изготовлении препаратов: слишком много микроартропод под одним покровным стеклом. Это может помешать определению; частицы грязи в препарате; расположение покровного стекла ближе, чем 0,5 см к боковому краю предметного; пузырьки воздуха под покровным стеклом; сочетание очень крупных и мелких животных под одним покровным стеклом; недостаточно информативная этикетка. С одной стороны, в этикетке должна быть отражена вся необходимая (иногда частично зашифрованная) для данного исследователя информация о пробе, с другой — географические данные, понятные любому. Неудачны такие географические данные: «у второго моста», «д.Дубки», «Попереч.уч.». Возможны такие этикетки: «Московская обл.», «Коми, верх.Печора», «хреб.Эзоп». Для препаратов таксономической коллекции приводятся подробные географические сведения (желательны и точные координаты), дата и фамилия сборшика. При необходимости ее можно зашифровать, оставив ключевое слово и фамилию сборщика, например «В Бурятия 2008-54. сб.Чимитова».
Важно! В дальнейшем, после определения материала в препарате, он может быть полезен для других специалистов: таксономи- стов, фаунистов. Как правило, в будущем Ваши шифры не будут доступны для них. Но материал не пропадет, если указана хотя бы краткая географическая информация.
Препарат из жидкости Фора можно размочить, поместив его в камеру со 100%-ной влажностью (кладется влажный кусок ваты). Через 1-3 дня (зависит от возраста препарата, следить, чтобы вата всегда была мокрой) можно поднять покровное стекло и извлечь нужные экземпляры, и затем поместить их в новый препарат из жидкости Фора.



Для расправления сморщенных экземпляров из старых препаратов используется лактофенол д’Амман (фенол — 5 г, молочная кислота — 5 г, глицерин — 10 г, вода дистиллированная — 20 г), экземпляры слегка нагреваются и переносятся из лактофенола непосредственно в свежую каплю жидкости Фора. 
<< | >>
Источник: Потапов М.Б., Кузнецова Н.А.. Методы исследования сообществ микроартропод: пособие для студентов и аспирантов. 2011

Еще по теме Препараты на ровных предметных стеклах:

  1. Предметный указател
  2. АЛФАВИТНЫЙ ПРЕДМЕТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ
  3. ПРЕДМЕТНО-ИМЕННОЙ УКАЗАТЕЛЬ
  4. ПРЕДМЕТНО-ИМЕННОЙ УКАЗАТЕЛЬ
  5. ПРЕДМЕТНО-ИМЕННОЙ УКАЗАТЕЛЬ
  6. ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  7. Оценка экологической безопасности препаратов
  8. ПРОТИВОГРИБКОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  9. КОМБИНИРОВАННЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  10. ВИТАМИННЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  11. АНТИГИСТАМИННЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  12. ГОРМОНАЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  13. КОМБИНИРОВАННЫЕ СУЛЬФАНИЛАМИДНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
  14. СУЛЬФАНИЛАМИДНЫЕ ПРЕПАРАТЫ