Сыромятников Михаил Юрьевич. БИОЭНЕРГЕТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МИТОХОНДРИИЛЕТАТЕЛЬНЫХ МЫШЦ ШМЕЛЕЙ (BOMBUS TERRESTRIS L.). 2014
Специальность 03.01.04 – биохимия Диссертация на соискание учёной степеникандидата биологических наук
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы.
Цель и задачи исследования.
Научная новизна.
Практическая значимость.
Положения, выносимые на защиту.
Апробация работы.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Общая характеристика митохондрий
Общий план строения, происхождения и функций митохондрий
Комплекс I ЭТЦ
Комплекс II ЭТЦ
Комплекс III ЭТЦ
Комплекс IV ЭТЦ
Комплекс V ЭТЦ. АТФаза
Механизмы разобщения митохондриальной мембраны
Механизмы образования АФК в митохондриях
1.2. Катаболические процессы в летательных мышцах насекомых
1.2.1. Общая характеристика окислительного метаболизма насекомых
1.2.2. Гликолитический путь в летательных мышцах насекомых
Особенности функционирования цикла Кребса в летательных мышцах насекомых
Электрон-транспортная цепь митохондрий насекомых
Липиды как источник энергии для полёта насекомых
Образование АФК в клетках насекомых
Общая характеристика антиоксидантной системы
1.3.1. Активные формы кислорода и механизмы защиты клеток от его повреждающего действия
1.3.2. Характеристика основных антиоксидантных ферментов
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объект исследования
Методы исследования
Определение уровня потребления кислорода и выделения углекислого газа в процессе дыхания
Выделение митохондрий из летательных мышц шмелей
2.1.2.З. Определение концентрации белка
Оценка целостности внутренней мембраны митохондрий
Измерение мембранного потенциала митохондрий
Измерение активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ)
Измерение поглощения кальция митохондриями
Иммунодетекция белков (Вестерн-блот)
Выделение тотальной РНК
Проведение обратной транскрипции
Проведение полимеразной цепной реакции
Проведение RT-PCR
Статистическая обработка данных
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Окислительный метаболизм митохондрий летательных мышц шмелей
Интенсивность потребления кислорода и выделения углекислого газа шмелями
2.2.1.2. Характеристика катаболический активности митохондрий летательных мышц шмелей
Продукция активных форм кислорода митохондриями летательных мышц шмелей
Транспорт кальция через внутреннюю мембрану митохондрий летательных мышц шмелей
2.2.2. Влияние фунгицидов на биоэнергетические процессы в митохондриях летательных мышц шмелей
Идентификация генов основных антиоксидантных ферментов в ДНК шмеля, выявление уровня их экспрессии в покое и после продолжительного полёта
2.2.З.1. Разработка праймеров для генов шмелей
2.2.3.2. Выделение тотальной РНК из грудок шмелей и обратная транскрипция
Оптимизация условия отжига праймеров
Идентификация генов ключевых антиоксидантных ферментов летательных мышц шмелей с помощью PCR-реакций
Влияние продолжительного полёта на экспрессию генов ключевых антиоксидантных ферментов шмелей
Влияние направленного митохондриального антиоксиданта SKQ на продолжительность жизни шмеля
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
Книги и учебники по дисциплине Биохимия:
- Бердникова Ольга Сергеевна. ВОЗДЕЙСТВИЕ ГИПОКСИИ И СРЕДЫ ВЫСОКИХ КОНЦЕНТРАЦИЙ СО2 НА ОБРАЗОВАНИЕ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В КЛЕТКАХ РАЗЛИЧНЫХ ПО УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ - 2016 год
- Карпеченко Никита Александрович. АНАЛИЗ БЕЛКОВЫХ СПЕКТРОВ ФЕРМЕНТОВ МЕТАБОЛИЧЕСКИХПУТЕЙ И ИНВЕРТИРОВАНЫХ ПОВТОРОВ ДНК ДРЕВЕСНЫХРАСТЕНИЙ ДУБА ЧЕРЕШЧАТОГО, ПРОИЗРАСТАЮЩИХ ВЛЕСОСТЕПИ ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ - 2014 год
- ГУСЕВ Юрий Сергеевич. СТРУКТУРА И ФУНКЦИИ БЕЛКА VirE2 В ПЕРЕНОСЕ оцДНК ВЭУКАРИОТИЧЕССКИЕ КЛЕТКИ - 2014 год